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平板接種菌之后沒有菌落生長的情況分析

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-05-15
核心提示: 我們做微生物實驗的時候,常用平板接種菌落,經常會遇到在給平板接種菌之后卻沒有菌落生長的情況。今天,我們來分析一下出
 我們做微生物實驗的時候,常用平板接種菌落,經常會遇到在給平板接種菌之后卻沒有菌落生長的情況。今天,我們來分析一下出現(xiàn)這種情況的原因。本文將從菌種、人員操作、培養(yǎng)基和添加劑三個方面來分析。

一、菌種原因

 

  1. 菌種老化

    菌種如果經過連續(xù)頻繁的傳代達十幾次甚至幾十次,就會造成菌種老化,岀現(xiàn)生長緩慢甚至不生長的情況。

  2. 野生菌種

    相比于標準菌株,有一些野生分離的菌種本身比較脆弱,對營養(yǎng)要求比較高,對外界不良環(huán)境也比較敏感,難以在普通的平板上生長,往往需要加入特殊的營養(yǎng)物質。

  3. 菌種沒有進行充分活化

    當我們拿到一株菌的時候,該菌種往往是處于—個保藏狀態(tài)的,這就需要我們通過合適的培養(yǎng)基來逐代擴大培養(yǎng),得到活力旺盛的菌株,所以充分活化的目的就是要讓菌種逐漸適應培養(yǎng)環(huán)境,從而在平板上快速生長。

  4. 樣品中的菌

    有的樣品中本身含菌量就較少,如水樣、供試液等,接種量低造成平板上無菌生長。還有的樣品中含有一些抑菌成分,會殺死樣品中的菌,導致無菌落生長。

  5. 購買的商品化菌株

    有一些商品化的菌株,如益生菌、菌肥、可食用真菌等,本身進行過基因改造,不能進行連續(xù)傳代擴大培養(yǎng),故在平板上難以生長。

二、人員操作不當

 

1、容器未洗刷干凈,殘留的抑菌成分導致菌不生長。

2、培養(yǎng)基配置過程中稱量錯誤,加入添加劑比例錯誤等。

3、過度滅菌,有很多培養(yǎng)基成分不耐高溫,過度滅菌會導致成分失效。

4、調pH值錯誤,不同溫度下培養(yǎng)基的pH值也會不一樣,未正確的調配pH值,也會導致菌不生長。

5、在實驗操作過程中失誤,特別是在稀釋菌液過程中少接或者錯接菌。

6、未放置合適的培養(yǎng)條件,根據(jù)不同菌對氧氣的需求程度,可以分為需氧、厭氧、需氧培養(yǎng)等。根據(jù)不同菌對溫度的需求,又可以在25°C、30°C、35°C、42°C、56°C等不同溫度下培養(yǎng)。

三、培養(yǎng)基及添加劑原因

 

1、成品培養(yǎng)基本身質量不好,如原材料純度不高、含有抑菌成分、原材料之間配比錯誤等都會導致成品培養(yǎng)基不合格。

2、特殊培養(yǎng)基及添加劑未正確存放,未遮光、冷藏、嚴格密封保存等導致失效。

3、培養(yǎng)基及添加劑超過有效期或者臨近有限期,營養(yǎng)成分存在一定程度的失效導致菌不生長。

4、培養(yǎng)基及添加劑營養(yǎng)不夠或者不適合培養(yǎng)某類菌種。有一些菌種本身營養(yǎng)要求比較特殊,需要添加某些特殊營養(yǎng)后方能生長。

5、培養(yǎng)基pH值發(fā)生改變,有一些特殊的成品培養(yǎng)基pH值隨時間會存在一定程度的改變,在使用前需要對pH值重新進行調整,否則也會導致菌不生長。

編輯:songjiajie2010

 
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