一、切片前的準(zhǔn)備： 

1、恒溫水浴 鍋首先預(yù)熱至35℃—40℃。

2、蠟塊整修，將蠟塊組織面的石蠟用刀修去，使組織全部暴露出切面并修平，以減少切片刀的磨損。將組織塊左右兩側(cè)的石蠟在不損傷組織及影響診斷的原則上，全部切除；否則切片容易皺褶。組織塊上下邊緣的石蠟視組織情況修齊修平；石蠟不須留得過多，應(yīng)盡量少留，以保持組織間距的最小限度。這樣切下的切片既呈帶狀，也不彎曲。片距小，在貼片時(shí)就可相應(yīng)多貼片，有利于檢查診斷。修切蠟塊時(shí)只能一點(diǎn)一點(diǎn)地切掉蠟邊，要是大片修切易使蠟塊斷裂露出組織；遇此情況應(yīng)返入新蠟再次包埋。

3．載玻片應(yīng)事先洗滌干凈，無(wú)油膩和不透明現(xiàn)象，應(yīng)將載玻片浸入酸缸內(nèi)12小時(shí)后流水沖洗，再烤干備用。根據(jù)切片需要張數(shù)，每片涂上一層極薄的蛋白甘油，插于載片板（或載片架）上備用。

蛋白甘油的配制：取新鮮雞蛋1份加甘油1份再加適量麝香草酚攪勻。此法主要是防止脫片，實(shí)際上一張很清潔的載玻片不涂蛋白甘油也不會(huì)脫片。

4、將鋒利的刀片裝入切片刀夾鉗內(nèi)，調(diào)整角度和位置后隨即緊固，檢查切片刀的傾斜度是否正確，傾角過大、則切片上卷；傾角過小則切片皺起，以20°-30°為佳。

5、備用小型毛筆、小型無(wú)鉤鑷子、鉛筆。

 

二、切片的步驟：

1、將蠟塊固定于切片機(jī)頭上的夾座內(nèi)，調(diào)整到稍離開切片能夠切到的位置上，注意蠟塊組織切面與切片刀口要垂直平行。

2、再調(diào)整蠟塊組織切面恰好與刀口接觸，旋緊刀架，固定好機(jī)頭。

3、根據(jù)需要調(diào)整切片厚度。

4、搖動(dòng)切片機(jī)手輪先進(jìn)行修整切片，直到切出完整的最大組織切面后，再進(jìn)行切制。

5、實(shí)踐中可用右手轉(zhuǎn)動(dòng)切片機(jī)手輪，左手用毛筆托起蠟片，協(xié)調(diào)地進(jìn)行切片操作。

6、切下的切片帶，一端用鑷子輕輕拉起，應(yīng)盡可能將切片帶拉直展開，用毛筆將切片帶從刀口向上挑起，拉下切片帶，然后輕拖鋪于恒溫水面上。

 

三、切片的注意事項(xiàng) 

1、切片質(zhì)量的好壞，除與技術(shù)熟練程度和切片機(jī)的好壞有關(guān)外，切片刀是決定的因素，所以刀一定要磨得十分鋒利。否則在切片時(shí)會(huì)自行卷起或皺起，或?qū)⒔M織劃傷出現(xiàn)刀痕，更不能順利地將切片切成連續(xù)地長(zhǎng)條帶狀。切片刀如有缺口存在，將使制成的切片斷裂、破碎，不完整，切片時(shí)應(yīng)時(shí)時(shí)擦凈刀口。

2、切片機(jī)的各個(gè)零件和螺絲應(yīng)旋緊，否則將會(huì)產(chǎn)生震動(dòng)。在每次更換蠟塊時(shí)，應(yīng)習(xí)慣地檢查一下組織塊是否夾緊，切片刀是否穩(wěn)固，稍有疏忽就會(huì)影響切片質(zhì)量，甚至將蠟塊全部切壞，造成不可彌補(bǔ)的后果。在切制切片的開頭階段如出現(xiàn)切制不良與其他故障，最常見的原因是蠟塊或切片刀的松動(dòng)所致。

3、在搖動(dòng)切片機(jī)時(shí)，用力要求均勻一致，不宜過重過猛，否則可因用力過重而使機(jī)身震動(dòng)，造成切片厚薄不均。遇有硬化過度的腦、肝、脾等組織時(shí)，更應(yīng)該輕輕切削，以防組織由于震動(dòng)形成空洞現(xiàn)象。

4、在夏秋季節(jié)進(jìn)行切片時(shí)，應(yīng)使用冰塊加強(qiáng)冷卻，這樣不僅可保持石蠟的硬度，同時(shí)也減少了切片的褶皺，給切片制作帶來(lái)方便。

 

四、貼片 ：

1、將單張或數(shù)張切片，用鑷子夾住蠟片的一邊并提起，鋪于恒溫水中，（光亮的一面朝下）立即用毛筆輕輕拉展以切片無(wú)皺褶為最好。如有皺褶時(shí)用鑷子細(xì)心地逐個(gè)輕輕撥開，注意不可撥破組織。然后分開每張切片，選取其中最完整的，沒有皺褶的切片。

2、待切片在恒溫水內(nèi)充分?jǐn)傞_展平后，將載玻片垂直插入水中以涂有蛋白甘油面輕靠切片，并用毛筆將切片一邊撥于玻片上，隨即將玻片直立提起，趁玻片上仍有少量水份時(shí)用毛筆，撥正切片位置。如組織較小，可在玻片上多貼幾片或幾排，但排列應(yīng)密集、整齊。

3、用鉛筆在玻片一端的毛玻璃上寫上標(biāo)本編號(hào)，字要寫得小而清楚、端正。

4、將附貼好的切片置于60℃恒溫箱 內(nèi)干燥2小時(shí)，蛋白質(zhì)凝固后即可進(jìn)行染色。