酶的固定化方法不下百種,歸納起來大致可以分為三類,即載體結(jié)合法、交聯(lián)法和包埋法。
(一)載體結(jié)合法
載體結(jié)合法是指將酶固定到非水溶性載體上的方法。根據(jù)固定方式的不同,這種方法又可以分為物理吸附法、離子結(jié)合法和共價結(jié)合法。物理吸附法是指將酶吸附到固體吸附劑表面的方法,固體吸附劑多為活性炭和多孔玻璃等。離子結(jié)合法是指通過離子鍵將酶結(jié)合到具有離子交換基團的非水溶性載體上的方法,載體有離子交換樹脂等。共價結(jié)合法是指酶和載體以共價鍵的形式結(jié)合在一起的方法,這種方法需要酶和載體都具有氨基、羧基或羥基等官能團。
(二)交聯(lián)法
交聯(lián)法是指通過雙功能試劑,將酶和酶聯(lián)結(jié)成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的方法。交聯(lián)法使用的交聯(lián)劑是戊二醛等水溶性化合物。
(三)包埋法
包埋法是指將酶包裹在多孔的載體中。例如,將酶包裹在聚丙烯酰胺凝膠等高分子凝膠中,或包裹在硝酸纖維素等半透性高分子膜中。前者包埋成格子型,后者包埋成微膠囊型。
與固定化酶技術(shù)相配套的是酶生物反應(yīng)器。一個安裝有固定化酶材料的容器就是酶生物反應(yīng)器,它是把反應(yīng)物質(zhì)變成產(chǎn)品的重要生產(chǎn)車間。如葡萄糖溶液緩緩流進(jìn)裝有葡萄糖異構(gòu)酶的生物反應(yīng)器,出來的就是比原來溶液甜得多的新液體。