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LST培養(yǎng)基滅菌失敗的原因分析

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2019-04-23
核心提示:大腸菌群(大腸桿菌)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基(LST)滅菌時(shí),偶爾會(huì)有小氣泡留在小導(dǎo)管內(nèi),導(dǎo)致培養(yǎng)基不能使用。重復(fù)滅菌不僅費(fèi)時(shí)費(fèi)電,還
 大腸菌群(大腸桿菌)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基(LST)滅菌時(shí),偶爾會(huì)有小氣泡留在小導(dǎo)管內(nèi),導(dǎo)致培養(yǎng)基不能使用。重復(fù)滅菌不僅費(fèi)時(shí)費(fèi)電,還會(huì)破壞培養(yǎng)基的成分。為了避免問題的發(fā)生,根據(jù)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)和嚴(yán)密思考做出幾種原因分析,并給予解決的辦法。

原因一:過早打開滅菌鍋


當(dāng)滅菌鍋壓力表示數(shù)為0而溫度表示數(shù)還高于室溫時(shí),不要打開滅菌鍋。因?yàn)榇蜷_鍋蓋瞬間,鍋內(nèi)大量熱量散出,溫度突然降低,試管內(nèi)溫度也隨著降低,導(dǎo)致管內(nèi)氣壓減小,沸點(diǎn)降低,部分水會(huì)汽化留在小導(dǎo)管內(nèi)。


解決辦法:等滅菌鍋內(nèi)氣壓和溫度都降到與室溫一致或相差不大時(shí)再打開滅菌鍋。

 

原因二:試管塞塞得太緊


試管塞塞得太緊在滅菌時(shí)會(huì)導(dǎo)致試管內(nèi)與滅菌鍋內(nèi)壓力不一致。在滅菌鍋升溫升壓時(shí),鍋內(nèi)壓力會(huì)大于管內(nèi)壓力;滅菌鍋降溫降壓時(shí),鍋內(nèi)壓力小于管內(nèi)壓力。鍋內(nèi)壓力大于管內(nèi)壓力時(shí),試管內(nèi)壓力不夠,不能將小導(dǎo)管內(nèi)氣體排盡,就留有氣泡;鍋內(nèi)壓力小于管內(nèi)壓力時(shí),可能會(huì)使試管塞和培養(yǎng)基崩出,培養(yǎng)基報(bào)廢。


解決辦法:改用透氣性好的棉花塞,切勿使用橡皮塞。

 

原因三:小導(dǎo)管口太小


我們可以把一根毛細(xì)管一端封口,另一端插進(jìn)水里,毛細(xì)管里怎么都不會(huì)進(jìn)水。同樣把一個(gè)燒杯倒扣進(jìn)水里就很容易進(jìn)水了。小導(dǎo)管在加壓后一方面水要進(jìn)去,另外里面的空氣要出來,如果口太小的話,空氣不容易出去,水也不容易進(jìn)來,就會(huì)導(dǎo)致氣泡留在里面了。

 
解決辦法:改用內(nèi)空較大的導(dǎo)管,盡量使用V型管,不要使用錐型管。

 

原因四:培養(yǎng)基質(zhì)量引起


由培養(yǎng)基質(zhì)量引起氣體不能排盡或培養(yǎng)基含有高溫高壓分解產(chǎn)氣的成分。滅菌時(shí)用水做培養(yǎng)基組的對(duì)照試驗(yàn),若培養(yǎng)基組有氣泡,而對(duì)照組沒有氣泡,可確定是由此原因引起。


解決辦法:改用其它培養(yǎng)基。

 

原因五:滅菌鍋壓力不夠氣體不能排盡


滅菌鍋?zhàn)畲髩毫Σ粔虿荒苁构軆?nèi)液體強(qiáng)行把氣體擠出,最后還留有小氣泡,還會(huì)使溫度上升緩慢,或達(dá)不到滅菌溫度。此原因的可能性較小,我們可以在排除原因一、二、三、四的情況下,用不加試管塞、大口導(dǎo)管做試驗(yàn),若還仍不能達(dá)到效果,就要檢查滅菌鍋了。


解決辦法:修理滅菌鍋。



注意事項(xiàng):
1.小導(dǎo)管內(nèi)出現(xiàn)氣泡通常是由前3種原因引起的,實(shí)際操作中可以按以上順序進(jìn)行排查。2.千萬不要將試管倒置,以免試管口和試管塞受培養(yǎng)基污染。

 

 


編輯:songjiajie2010

 
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