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一、
實(shí)驗(yàn)室操作標(biāo)準(zhǔn)程序
1 目的
建立高壓滅菌鍋操作以及維護(hù)保養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)程序，規(guī)范操作人員的操作，從而確保人員的安全及設(shè)備的正常運(yùn)行。
2 范圍
適用于本所高壓蒸汽滅菌器滅菌效果的驗(yàn)證。
3 職責(zé)
3.1 質(zhì)量負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)該驗(yàn)證程序。
3.2 質(zhì)量監(jiān)督員負(fù)責(zé)監(jiān)督該程序的實(shí)施。
3.3 檢驗(yàn)人員負(fù)責(zé)該程序的實(shí)施，并做好相關(guān)記錄。
4 程序
4.1 檢驗(yàn)人員按該程序?qū)嵤?/span>驗(yàn)證，做好記錄，做出結(jié)果評(píng)價(jià)，上報(bào)質(zhì)量負(fù)責(zé)人。
4.2 以上驗(yàn)證結(jié)果經(jīng)質(zhì)量負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)，以后高壓蒸汽滅菌器按驗(yàn)證的方法操作。
5 試驗(yàn)步驟
高壓蒸氣滅菌器使物品滅菌后達(dá)到無(wú)菌要求，這是藥品實(shí)驗(yàn)中的基本保證。高壓滅菌器滅菌效果是否合格足實(shí)驗(yàn)成敗的最基礎(chǔ)最關(guān)鍵的首要步驟。除少數(shù)培養(yǎng)基只需加熱溶解，不需高壓滅菌外，大部分培養(yǎng)基均需121℃高壓滅菌15-30分鐘。尤其是對(duì)無(wú)菌試驗(yàn)培養(yǎng)基滅菌不徹底，直接關(guān)系到對(duì)藥品的無(wú)菌試驗(yàn)結(jié)果。因此必須認(rèn)真對(duì)高壓滅菌器進(jìn)行滅菌效果的驗(yàn)證。為此我們提供了進(jìn)行滅菌效果驗(yàn)證的一個(gè)簡(jiǎn)易可行的方法。
(1)嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片。
嗜熱脂肪芽胞桿菌(Bacillus stearothermophilus)ATCC7053是本法常用的生物指示菌，含芽胞量5-lO5 CFU/片。
(2) 121℃壓力蒸氣滅菌化學(xué)指示卡。
(3)溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基116℃高壓滅菌20分鐘后備用。
(4)O—150℃留點(diǎn)溫度計(jì)
將嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片（以下簡(jiǎn)稱菌片）用無(wú)菌鑷子放人密封試管中�；瘜W(xué)指示卡和留點(diǎn)溫度計(jì)放入敞口試管中。以上兩種試管各準(zhǔn)備5-10份。分別放置在高壓滅菌器蒸氣口處、底部排氣口處及底部出水口處或上下左右中間5處。如滅菌器為二層，則需放10處。
留點(diǎn)溫度計(jì)標(biāo)化合格后方可用于驗(yàn)證試驗(yàn)。檢測(cè)前，需將溫度計(jì)的水銀柱甩至40℃以下。每次監(jiān)測(cè)后留點(diǎn)溫度計(jì)的溫差應(yīng)存l℃之間，則說(shuō)明滅菌器內(nèi)的溫度分布是均勻的。
滅菌后的菌片應(yīng)在嚴(yán)格無(wú)菌操作條件下放入滅菌后的溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基內(nèi)56-60℃培養(yǎng)24-48小時(shí)，觀察顏色變化。如培養(yǎng)基變?yōu)辄S色，說(shuō)明菌片中的嗜熱脂肪芽胞桿菌尚未完全滅活，細(xì)菌仍可在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，分解葡萄糖產(chǎn)酸變?yōu)辄S色。如培養(yǎng)基顏色不變化仍為紫色，則說(shuō)明芽胞已滅活。同時(shí)要用未經(jīng)滅菌的紙片放入培養(yǎng)基內(nèi)作為陽(yáng)性對(duì)照，不加紙片的空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照。
化學(xué)指示卡上的指示色塊，在高壓蒸氣滅菌時(shí)，由淡黃色變?yōu)楹谏�。隨著顏色變化的深淺，并與對(duì)照色相比，可判斷滅菌效果是否達(dá)到要求�；瘜W(xué)指示卡應(yīng)在干燥處保存。遇潮會(huì)變色，影響滅菌效果的觀測(cè)。
高壓蒸氣滅菌必須使蒸氣順利進(jìn)入滅菌器內(nèi)，與滅菌物品接觸，并將原有的冷空氣排出方可達(dá)到滅菌的效果。要進(jìn)行空載熱分布和滿載熱穿透力驗(yàn)證(滿載時(shí)不超過(guò)總體積的2/3)。二種驗(yàn)證各重復(fù)三次，共做六次。
5個(gè)點(diǎn)六次試驗(yàn)表明溫度均在121℃，化學(xué)指示卡變黑；程度與對(duì)照色一致；培養(yǎng)基均未改變顏色，說(shuō)明高壓蒸氣滅菌效果合格。
6 驗(yàn)證結(jié)果與評(píng)定
驗(yàn)證結(jié)束后，驗(yàn)證人員依據(jù)試驗(yàn)結(jié)果對(duì)本次驗(yàn)證做出評(píng)價(jià)和結(jié)論，并擬定高壓蒸汽滅菌器的操作規(guī)程和滅菌驗(yàn)證頻次，上報(bào)質(zhì)量負(fù)責(zé)人。
7 質(zhì)量記錄
7.1《高壓蒸汽滅菌效果驗(yàn)證記錄》
2、
日常定期維護(hù)保養(yǎng)
對(duì)高壓滅菌鍋需進(jìn)行日常定期維護(hù)保養(yǎng)。對(duì)于密封圈等易老化的零部件，應(yīng)經(jīng)常檢查，如有損壞及時(shí)更換。
高壓滅菌鍋操作注意事項(xiàng)：
使用高壓蒸氣滅菌器時(shí)，首先應(yīng)注意在開(kāi)放蒸氣的同時(shí)，排除滅菌器內(nèi)的冷空氣。必須將器內(nèi)冷空氣全部排除后，才可關(guān)閉排氣孔。假如滅菌器內(nèi)仍存留有部分空氣時(shí)，剛壓力表上雖已達(dá)到了某一壓力值，但器內(nèi)之溫度仍未達(dá)到相應(yīng)之度數(shù)。存留的空氣越多，剛二者相差也越大。差也越大，器內(nèi)溫度不足，滅菌則不徹底。
