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[分享]培養(yǎng)基使用常見問題解答

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2022-05-09
核心提示:1.含瓊脂培養(yǎng)基冷卻至25℃后已凝固,如何測定其pH?答:有專門的固體培養(yǎng)基pH計。2.滅菌后的培養(yǎng)基是否都要測pH值?如何測定pH值
 1.含瓊脂培養(yǎng)基冷卻至25℃后已凝固,如何測定其pH?

答:有專門的固體培養(yǎng)基pH計。

2.滅菌后的培養(yǎng)基是否都要測pH值?如何測定pH值?

答:每個制備批次的培養(yǎng)基都應(yīng)測定pH,可采用pH試紙或pH計測量。

3.稀釋液滅菌后pH值是否有變化?有何影響?(如pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液,pH6.8無菌磷酸鹽緩沖液)

答:一般pH有下降現(xiàn)象,約0.2左右,不同培養(yǎng)基pH變化可能不同。

4. 孟加拉培養(yǎng)基是否可以取代玫瑰紅鈉瓊脂進(jìn)行培養(yǎng)霉菌和酵母菌?

答:根據(jù)中國藥典,采用玫瑰紅鈉瓊脂。

5. 配制PH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液時有時因為高壓滅菌器滅菌過程溫度過高而導(dǎo)致培養(yǎng)基混濁了,這種情況緩沖液還能用嗎?

答:建議按正常溫度滅菌,混濁培養(yǎng)基建議不要使用。

6.含瓊脂培養(yǎng)基在冷藏中形成冰晶怎么處理?銷毀還是加熱再用?

答:建議不要使用。

7.融化的培養(yǎng)基為什么不能再冷水中冷卻?

答:防止受熱不均引起結(jié)塊。

8. 滅菌后,滅菌鍋需自然冷卻降壓才可以打開,這段時間是否會造成過度滅菌。

答:自然冷卻過程已經(jīng)計算在正常滅菌時間內(nèi)了,不會造成過度滅菌。

9. 培養(yǎng)基所用器具若使用濕熱滅菌,是否必須待干燥后才可以使用?若烘干或其它方法,中間過程怎樣防止微生物污染?

答:如果是馬上使用且不是用于非水溶性供試液的制備及實驗,不一定要烘干;否則,應(yīng)干燥后使用,滅菌及干燥盡量在同一鍋里進(jìn)行,或用紗布和牛皮紙包扎緊密。

10. 培養(yǎng)基的避光儲存,是否配置好的培養(yǎng)基其全部放避光儲存?

答:最好都避光保存。無條件時,光敏感的培養(yǎng)基一定要。

11. 商品培養(yǎng)基干粉說是加蒸餾水溶解,實際操作是否可以用純化水或注射用水?

答:只要不含有任何可能抑制或影響微生物生長的物質(zhì)的水均可。

12. 培養(yǎng)基及器具滅菌可否同一設(shè)備同滅菌時間進(jìn)行滅菌?

答:最好分開滅菌,條件不允許時可同爐滅菌,前提是都是潔凈無污染的。

13. 培養(yǎng)基的保溫能否用60℃的培養(yǎng)箱,它與45℃—55℃水浴鍋保溫方法有何不同?

答:可以用恒溫培養(yǎng)箱保溫,但保溫溫度一般是50℃左右,且時間不能過長,一般是不超過4小時。

14. 培養(yǎng)基的貯存是否需要放置于210℃冰箱內(nèi)?

答:需冷藏保存的培養(yǎng)基外包裝上會寫明。

15. 培養(yǎng)基滅菌后成份會有所蒸發(fā)減少,如何處理這個問題?

答:正常情況下蒸發(fā)量較少,可忽略不計。

16. 培養(yǎng)基融化后出現(xiàn)渾濁是有哪些方面的原因引起的?應(yīng)如何避免?

答:可能的情況有 1. 培養(yǎng)基配置用水不符合規(guī)定;2. 滅菌過程溫度升溫慢或降溫慢;3. 培養(yǎng)基儲存不當(dāng);4. 融化時沸騰時間較長等。

17. 準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基有效期如何驗證?

答:定期取出培養(yǎng)基驗證其無菌性,促生長能力等方面。

18. 培養(yǎng)基配制好滅菌后,在高壓容器中保溫降至50℃左右,可不可行?

答:建議最好不要,避免過度受熱。

19. 脫水培養(yǎng)基對濕度是否有要求?多少適宜?

答:按要求室溫干燥環(huán)境儲存即可。

20. 培養(yǎng)基pH值測定溫度在25℃,這個溫度應(yīng)怎么控制?比如固體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基使用過程中還能調(diào)節(jié)pH值嗎?

答:可水浴控制培養(yǎng)基溫度。

21. 配制培養(yǎng)基過程中,按說明書稱定量,加規(guī)定的純化水,煮沸溶解,為了避免煮沸過程總減少水分,是否要在配制過程適當(dāng)增加水?比如陪硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基.。

答:可適量增加,自己掌握。

22. 商品培養(yǎng)基一定要當(dāng)天配當(dāng)天用嗎?可否在一周內(nèi)用完?

答:不是即配即用的培養(yǎng)基的話,儲存得當(dāng),可以使用。

23. 稱量培養(yǎng)基時,注意不要吸入粉末,這粉末是指何物?

答:就是你所稱量的干粉培養(yǎng)基 ,因為培養(yǎng)基的粉末對呼吸道有刺激作用,而且培養(yǎng)基中的某些成分,如亞硒酸鹽、疊氮化鈉、乙酰胺等,長期吸入并在體內(nèi)累積到一定量會對人體健康有危害。所以培養(yǎng)基配制稱量需做好個人防護(hù),且最好選擇少粉塵環(huán)保型顆粒培養(yǎng)基。

24. 煮培養(yǎng)基,用不銹鋼鍋在電磁爐上煮可行?硫乙醇培養(yǎng)基是否要煮沸?如何煮沸?用不銹鋼鍋在電磁爐上煮沸可行嗎?可不可以水浴煮沸呢?

答:硫乙醇應(yīng)煮沸,量大時,我實驗室用不銹鋼鍋在電磁爐上煮沸。不建議水浴煮沸,因為水浴煮沸瓊脂粉很難溶,導(dǎo)致瓊脂分裝不均勻,前段分裝的瓊脂含量少,后段分裝的瓊脂含量高,導(dǎo)致有的管或瓶中的凝固。

25. 如培養(yǎng)基在高壓滅菌器中溫度需自然下降20度才開蓋嗎?

答:高溫滅菌器有安全閥,溫度下降到安全閥可打開時將培養(yǎng)基取出室溫冷卻,各型號滅菌器安全開蓋溫度不盡相同。

編輯:songjiajie2010

 
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