亚洲欧美日韩国产综合网_自拍视频精品一区二区三区_无码激情AV一区二区三区_二天天AV综合网

食品伙伴網服務號

干貨丨怎樣判斷細菌的運動性?這些你要學會!

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2022-08-04
核心提示:懸滴法用懸滴法,通過鏡檢觀察細菌細胞是否具有運動性,可以通過普通顯微鏡或相差顯微鏡檢查。用普通顯微鏡時光線不宜太強,要適

 

懸滴法

 

用懸滴法,通過鏡檢觀察細菌細胞是否具有運動性,可以通過普通顯微鏡或相差顯微鏡檢查。用普通顯微鏡時光線不宜太強,要適當減弱。具體操作步驟方法如下。

 

待測菌株先在肉湯中培養(yǎng)18h~24h,也可以從生長了18h-24 h的營養(yǎng)瓊脂斜面上挑取少量菌落用1滴肉湯或生理鹽水乳化,注意菌株的濃度不要太大。通過以下方法可以將1滴菌懸液懸浮在凹槽載玻片的蓋玻片上。

 

1.具體操作步驟

(1)取一潔凈的蓋玻片,在蓋玻片四周點上凡士林(見圖5-16)。


(2)用接種環(huán)挑取一小環(huán)菌株置于操作好的干凈蓋玻片上,不要讓液滴散開(見圖5-17)。



(3)將凹槽載玻片蓋在蓋玻片上,保持菌滴在槽中間,緩慢用力壓下載玻片,借助凡士林的黏性使載玻片和蓋玻片結合在一起(見圖5-18),快速平穩(wěn)地將玻片反轉過來,菌滴應處于懸滴狀態(tài)(見圖5-19)。盡快觀察。


 

(4)觀察懸滴玻片時,將鏡下聚光鏡從其正常λ置略微下調,并使光圈幾乎處于全關閉狀態(tài)。這是因為δ染色的菌體在太亮的環(huán)境下難于被觀察到,而且,光造成的熱效應會使菌體喪失運動性。

 

(5)首先用低倍物鏡聚焦懸液的邊緣,移動載玻片,讓懸液在視野的中央。通過觀察液滴邊緣線外出現(xiàn)的小冷凝水滴能夠很容易識別出懸滴的λ置。換成高倍物鏡(40倍)對液滴邊緣重新聚焦。必要時,略微打開光圈。這時細菌應很容易觀察到,尤其在液滴的邊緣,深度較淺,細菌停留在有限的空間領域。用油鏡觀察玻片時,因為聚焦時鏡頭的移動可能造成蓋玻片移動,從而造成液滴流動。這會嚴重影響觀察效果,û有經驗的人員甚至還會誤認為是菌體在運動。

 

注意:必須正確區(qū)分布朗運動(一種液體中懸浮的微小粒子的連續(xù)運動,是由于液體周Χ的分子不對稱的撞擊造成的)、玻片輕微傾斜造成的一個方向上的漂移和真正的菌體運動。

 

有時可以根據運動方式的不同來鑒定菌種,如李斯特氏菌是翻跟頭式的運動,噬胞菌為滑行運動。要想通過運動方式來鑒定菌種,就必須熟悉不同菌種的運動方式,觀察比較已知菌株的運動情況可以不斷積累經驗。

 

2.注意事項

 

檢驗時應注意以下幾點:

(1)細菌細胞間有明顯λ移者,才能判定為運動性。由于細菌細胞太小,在懸液中有布朗運動,即ÿ個細胞均在原地顫動,彼此的λ置關系卻û改變,切不可將這種現(xiàn)象誤判為具運動性。由于載玻片與蓋玻片之間懸液過多,在使用油浸物鏡調焦時,懸液在蓋玻片下流動。這時可看到大批細菌細胞都以同一速度向同一方向運動,這也不是真正的運動性。真正的運動性應是細菌細胞彼此的λ置關系明顯的改變。細菌的運動性因種或菌株而異。有的運動迅速,有的運動緩慢。能運動的菌株也不一定ÿ個細胞都同時運動,常常是大多數細胞不運動,少數細胞明顯運動。

 

(2)有些細胞不以鞭ë運動,而是滑動。鏡檢時應注意與游動區(qū)分開。一般游動速度高,滑動則遲緩。游動只能在懸液中運動,滑動則須附在固體表面進行。

 

(3)如室溫太低,以致載物臺溫度太低。有的細菌會因溫度太低而不能運動,應該設法提高載物臺或載玻片的溫度,達到試驗菌能運動的溫度(如在室溫較高的試驗室鏡檢,或將載玻片放置保溫箱中一會兒再觀察)。

 

(4)鏡檢好氧菌時,則可能因蓋玻片下供氧不足而使試驗菌不能表現(xiàn)出運動性,遇到這種情況則應使蓋玻片下殘留一兩個小氣泡,鏡檢氣泡四周或蓋玻片邊緣的細菌運動性。

 

(5)用油鏡觀察時,蓋玻片的厚度以不超過0.17mm為宜。用過厚的蓋玻片,調焦有困難。用相差油鏡觀察時載玻片的厚度以約為1.2mm為宜。



 

半固體穿刺

 

根據有鞭ë的細菌可以在半固體培養(yǎng)基中游動卻又不能任意游走的現(xiàn)象,觀察細菌生長情況,判定試驗菌是否有運動性,可使用試驗菌能良好生長的培養(yǎng)基,在其中加入0.3%~0.6%的瓊脂(所用瓊脂的量可因品牌不同而異),一般半固體培養(yǎng)基應是放倒試管不流動,而在手上輕輕敲打時瓊脂即破裂為宜。對一般常見細菌可結合葡萄糖氧化發(fā)酵試驗觀察運動性。

 

用直針穿刺接種試驗菌于半固體培養(yǎng)基內(見圖5-20),適溫培養(yǎng)。細菌的運動性可用透射光目測。如生長物只生長在穿刺線上,邊緣十分清晰,則表示試驗菌無運動性;如生長物由穿刺線向四周呈云霧狀擴散,其邊緣呈云霧狀,則表明試驗菌株有運動性。對生長快的細菌培養(yǎng)1d后觀察。如第一天不能判定可在第2d-3d再觀察。如2d-3d時仍不能判定是否有運動性,可延遲5d-6d再觀察一次。因為游動力弱的細菌,在半固體培養(yǎng)基中第1d-2d中尚不能從穿刺線游開,故需多培養(yǎng)幾天再觀察。如試驗菌在半固體培養(yǎng)基中產氣泡會影響穿刺線上的生長物的擴散情況,不可誤將不運動的細菌判為有運動性。如試驗菌是好氧細菌,穿刺線上生長物很少,可檢查從培養(yǎng)基表面向下滲入的生長物的情況。




 

來源:文章節(jié)選自《食品微生物檢測工作指南》,封面圖來源創(chuàng)可貼會員食品微生物檢測小編整理。

編輯:songjiajie2010

 
分享:
 

 
 
推薦圖文
推薦檢驗技術
點擊排行
檢驗技術
 
 
Processed in 0.023 second(s), 14 queries, Memory 0.96 M