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【干貨分享】菌落繁殖為何會(huì)連成一片?

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2022-09-19
核心提示: 菌落總數(shù)檢測(cè)1、為什么平板計(jì)數(shù)瓊脂需要調(diào)節(jié)pH?  由于大部分細(xì)菌是嗜中性的,培養(yǎng)基為符合細(xì)菌生長(zhǎng)要求,需要調(diào)節(jié)pH至7
 菌落總數(shù)檢測(cè)



1、為什么平板計(jì)數(shù)瓊脂需要調(diào)節(jié)pH?

  由于大部分細(xì)菌是嗜中性的,培養(yǎng)基為符合細(xì)菌生長(zhǎng)要求,需要調(diào)節(jié)pH至7.0±0.2,盡量保證較適宜的環(huán)境,確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2、如何保證檢測(cè)結(jié)果的有效性?

設(shè)計(jì)空白對(duì)照

(1)檢驗(yàn)過(guò)程中需要做空白對(duì)照,用來(lái)判斷培養(yǎng)基、稀釋液、平皿或吸管是否存在污染,完美的空白試驗(yàn)平板上應(yīng)該無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)


實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求

(2)定期檢測(cè)空氣潔凈度,判斷實(shí)驗(yàn)環(huán)境是否符合標(biāo)準(zhǔn)要求。


滅菌處理

(3)細(xì)菌檢測(cè)過(guò)程中所用到的一切用具和培養(yǎng)基都需經(jīng)過(guò)滅菌程序。

3、如何提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性?

 


樣品消毒

(1)任何樣品在打開(kāi)包裝前,都要在取樣開(kāi)口處的周?chē)砻孢M(jìn)行消毒


(2)采樣時(shí)對(duì)于易堵塞吸管的樣品(如糕點(diǎn)面包辣條等),可以放置一塊無(wú)菌紗布在放樣液的容器瓶口下方,作過(guò)濾用。

 

 


稀釋度選擇

(3)不同的食品其「菌落總數(shù)」的檢出限量也不一致,通常糕點(diǎn)類(lèi)樣品中細(xì)菌量偏低,稀釋度應(yīng)選擇較小的,稀釋度可選1:10 。

糕點(diǎn)的菌落總數(shù)限量標(biāo)準(zhǔn)

4、為什么瓊脂凝固后需要倒置?

  平板倒置培養(yǎng),可以減少培養(yǎng)基中水分的蒸發(fā)影響細(xì)菌生長(zhǎng),又可以防止凝結(jié)在皿蓋上的水蒸氣流到培養(yǎng)基表面導(dǎo)致染菌出現(xiàn)菌落蔓延及難以計(jì)數(shù)。

5、為什么培養(yǎng)基干裂?

  干裂是培養(yǎng)基的水份缺失導(dǎo)致,通常2種原因:

。1)培養(yǎng)箱內(nèi)部溫度不穩(wěn)定導(dǎo)致;

。2)培養(yǎng)基倒得太薄。

6、菌落蔓延的原因及解決辦法?

  菌落蔓延主要有兩個(gè)原因,一是操作不當(dāng);二是樣品中含有變形桿菌等運(yùn)動(dòng)性強(qiáng)的細(xì)菌。 



操作中需要注意3個(gè)關(guān)鍵點(diǎn):

(1)傾注培養(yǎng)基時(shí)搖晃平皿使其混合均勻,減少菌塊;

(2)樣品稀釋后,盡快傾注平板。從稀釋到傾注結(jié)束時(shí)間控制在30分鐘之內(nèi),避免樣液干涸造成菌落成團(tuán);平板凝固后馬上倒置;

(3)若樣品中含有變形桿菌,則可以覆蓋一層培養(yǎng)基(約4mL)。

7、異常現(xiàn)象平板如何進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)?




適宜范圍

多不可計(jì)

 

 

在完成培養(yǎng)后應(yīng)立即進(jìn)行計(jì)數(shù),通常選取30-300CFU菌落數(shù)、無(wú)蔓延菌落生長(zhǎng)的平板作為計(jì)數(shù),但實(shí)際操作中會(huì)出現(xiàn)各種異,F(xiàn)象。

  我們通過(guò)以下表格查看:

 

現(xiàn)象

計(jì)數(shù)方式

無(wú)任何明顯界限的鏈狀菌落

作為一個(gè)菌落

有幾條不同來(lái)源的鏈

每條鏈均應(yīng)按一個(gè)菌落計(jì)算

片狀菌落不到平板一半,而另一半又分布均勻

半個(gè)平板的菌落數(shù)乘2代表整塊平板的菌落數(shù)

 

另外,當(dāng)所有稀釋度的平板均無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng),則檢測(cè)報(bào)告應(yīng)以最低稀釋度報(bào)出,如最低稀釋度為1,則報(bào)為<1;若最低稀釋度為1:10,則報(bào)為<10,而不能報(bào)為「未檢出」。


編輯:songjiajie2010

 
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