1.沉降菌原理
通過(guò)自然沉降,收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿中,在適宜的溫濕度條件下,培養(yǎng)一定時(shí)間,讓其繁殖到可見菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),通過(guò)計(jì)數(shù)培養(yǎng)皿中的菌落數(shù),來(lái)判定潔凈環(huán)境中活的微生物數(shù),并以此來(lái)評(píng)定潔凈區(qū)域的潔凈度。
2.人員要求
測(cè)試人員應(yīng)經(jīng)過(guò)微生物相關(guān)培訓(xùn)后,取得潔凈區(qū)域負(fù)責(zé)人同意后進(jìn)入檢測(cè)。
3.檢測(cè)用培養(yǎng)皿
一般采用直徑φ90mm玻璃平板,經(jīng)滅菌后,在無(wú)菌操作下,注入冷卻至60℃左右的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基(TSA)或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(SDA)或經(jīng)驗(yàn)證過(guò)的培養(yǎng)基。加蓋凝固(倒平板過(guò)程中手要穩(wěn),防止手抖造成培養(yǎng)基灑落;移動(dòng)平板過(guò)程中動(dòng)作要輕緩,防止動(dòng)作過(guò)大,造成平板傾灑和摔落)。
4.檢測(cè)過(guò)程
4.1凝固后的培養(yǎng)皿須通過(guò)傳遞窗傳入潔凈區(qū)域,傳入前需嚴(yán)格消毒。
4.2根據(jù)規(guī)程中規(guī)定的布點(diǎn)圖,將標(biāo)記好的培養(yǎng)皿逐一放置,然后從里到外打開平皿蓋,使培養(yǎng)基便面最大程度的暴露在環(huán)境中。
4.3靜態(tài)測(cè)試:從里到外打開平皿蓋,操作人員接著退出潔凈區(qū)域,通過(guò)計(jì)時(shí),保證打開平皿蓋的培養(yǎng)皿在環(huán)境中暴露30min,這段時(shí)間內(nèi),禁止人員進(jìn)出。
4.4動(dòng)態(tài)測(cè)試:從里到外打開平皿蓋,操作人員在潔凈區(qū)域內(nèi)正常工作,通過(guò)計(jì)時(shí),保證打開平皿蓋的培養(yǎng)皿在環(huán)境中暴露4h(不夠4h,按照4h進(jìn)行換算),這段時(shí)間內(nèi),操作人員正常進(jìn)出潔凈區(qū)域。
4.5采樣結(jié)束后,將培養(yǎng)基倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基(TSA)置于30-35℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)3-5天;沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(SDA)置于20-25℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)5-7天。
5.菌落計(jì)數(shù)
5.1觀察培養(yǎng)皿中的菌落數(shù),并計(jì)數(shù),對(duì)于不明顯菌落,可用5-10倍放大鏡檢查,是否遺漏。
5.2若平板有2個(gè)或多個(gè)菌落重疊,可分辨,仍以2個(gè)或多個(gè)菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)。
來(lái)源:參考《中國(guó)藥典》,封面圖來(lái)源創(chuàng)可貼會(huì)員,藥物微生物檢驗(yàn)小編整理。