1.成分
其中的蛋白胨和牛肉粉主要提供細(xì)菌生長所需要的碳源、氮源、氨基酸及維生素。氯化鈉維持培養(yǎng)基中的滲透壓,瓊脂用做凝固劑。脫纖維羊血一方面提供一些特殊的生長因子,另一方面用于觀察溶血反應(yīng)。
2.制法
根據(jù)要求選擇取不同的學(xué)瓊脂平板基礎(chǔ),如營養(yǎng)瓊脂、豆粉瓊脂或哥倫比亞瓊脂(用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn))等,加蒸餾水溶解后,高壓滅菌。冷卻至50~55℃,加入一定量的羊血,緩慢混勻后傾注平板。注意一定要冷卻后再加入羊血,否則紅細(xì)胞有可能會(huì)破碎。
3.制備光潔平整不產(chǎn)氣泡的血平板技巧
自制的血平板有時(shí)會(huì)出現(xiàn)氣泡,坑洼凹凸不平的現(xiàn)象,如圖所示。
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原因分析:
很有可能是傾注培養(yǎng)基時(shí)培養(yǎng)基帶有氣泡,傾注平板,凝固后所致。
解決步驟:
(1)培養(yǎng)基滅菌后置水浴50-55℃保溫。
(2)血液一般冷藏。提前取出血液放置在室溫下,自然升溫至室溫。
(3)向培養(yǎng)基中添加血液。移液管吸取血液后加入培養(yǎng)基時(shí),緩慢放液,同時(shí)緩慢搖動(dòng)三角瓶使相互混勻。
(4)傾注培養(yǎng)基后,找平穩(wěn)地方(越水平越好)冷卻。
(5)收皿疊放保存。
錯(cuò)誤操作:
(1)培養(yǎng)基滅菌后高溫直接加血傾注,皿蓋水汽很多,造成后續(xù)影響。
(2)血液如果直接從冰箱里拿出來就馬上加入培養(yǎng)基,由于溫差較大,加入后很容易形成片狀凝固。
(3) 放液太快容易形成片狀凝固。搖動(dòng)太劇烈會(huì)形成氣泡,培養(yǎng)基粘度大氣泡形成后很難消除。
(4)如果不是平面,液體保持水平,而皿是斜的,最后造成培養(yǎng)基在某一直徑上形成一邊高一邊低的現(xiàn)象。
(5)不可急著收皿或急脾氣急著查看皿凝固了沒有。有時(shí)候看似凝固了,只是表面,倒過來或移動(dòng)后以會(huì)造成培養(yǎng)基坍塌或坑洼不平。
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