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菌落計數(shù)如何保證檢測結(jié)果的有效性?

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2023-12-26
核心提示: 菌落總數(shù)檢測1、為什么平板計數(shù)瓊脂需要調(diào)節(jié)pH?由于大部分細(xì)菌是嗜中性的,培養(yǎng)基為符合細(xì)菌生長要求,需要調(diào)節(jié)pH至7.0±
 菌落總數(shù)檢測



1、為什么平板計數(shù)瓊脂需要調(diào)節(jié)pH?
由于大部分細(xì)菌是嗜中性的,培養(yǎng)基為符合細(xì)菌生長要求,需要調(diào)節(jié)pH至7.0±0.2,盡量保證較適宜的環(huán)境,確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
2、如何保證檢測結(jié)果的有效性?

設(shè)計空白對照

(1)檢驗過程中需要做空白對照,用來判斷培養(yǎng)基、稀釋液、平皿或吸管是否存在污染,完美的空白試驗平板上應(yīng)該無細(xì)菌生長


實驗環(huán)境要求

(2)定期檢測空氣潔凈度,判斷實驗環(huán)境是否符合標(biāo)準(zhǔn)要求。


滅菌處理

(3)細(xì)菌檢測過程中所用到的一切用具和培養(yǎng)基都需經(jīng)過滅菌程序。

3、如何提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性?

 


樣品消毒

(1)任何樣品在打開包裝前,都要在取樣開口處的周圍表面進(jìn)行消毒


(2)采樣時對于易堵塞吸管的樣品(如糕點(diǎn)面包辣條等),可以放置一塊無菌紗布在放樣液的容器瓶口下方,作過濾用

 

 


稀釋度選擇

(3)不同的食品其「菌落總數(shù)」的檢出限量也不一致,通常糕點(diǎn)類樣品中細(xì)菌量偏低,稀釋度應(yīng)選擇較小的,稀釋度可選1:10 。

糕點(diǎn)的菌落總數(shù)限量標(biāo)準(zhǔn)

4、為什么瓊脂凝固后需要倒置?

  平板倒置培養(yǎng),可以減少培養(yǎng)基中水分的蒸發(fā)影響細(xì)菌生長,又可以防止凝結(jié)在皿蓋上的水蒸氣流到培養(yǎng)基表面導(dǎo)致染菌出現(xiàn)菌落蔓延及難以計數(shù)

5、為什么培養(yǎng)基干裂?

  干裂是培養(yǎng)基的水份缺失導(dǎo)致,通常2種原因:

。1)培養(yǎng)箱內(nèi)部溫度不穩(wěn)定導(dǎo)致;

。2)培養(yǎng)基倒得太薄。

6、菌落蔓延的原因及解決辦法?

  菌落蔓延主要有兩個原因,一是操作不當(dāng);二是樣品中含有變形桿菌等運(yùn)動性強(qiáng)的細(xì)菌。 



操作中需要注意3個關(guān)鍵點(diǎn):

(1)傾注培養(yǎng)基時搖晃平皿使其混合均勻,減少菌塊;

(2)樣品稀釋后,盡快傾注平板。從稀釋到傾注結(jié)束時間控制在30分鐘之內(nèi),避免樣液干涸造成菌落成團(tuán);平板凝固后馬上倒置;

(3)若樣品中含有變形桿菌,則可以覆蓋一層培養(yǎng)基(約4mL)。

7、異,F(xiàn)象平板如何進(jìn)行菌落計數(shù)?





 
 

適宜范圍           多不可計

在完成培養(yǎng)后應(yīng)立即進(jìn)行計數(shù),通常選取30-300CFU菌落數(shù)、無蔓延菌落生長的平板作為計數(shù),但實際操作中會出現(xiàn)各種異,F(xiàn)象。

  我們通過以下表格查看:

 

現(xiàn)象

計數(shù)方式

無任何明顯界限的鏈狀菌落

作為一個菌落

有幾條不同來源的鏈

每條鏈均應(yīng)按一個菌落計算

片狀菌落不到平板一半,而另一半又分布均勻

半個平板的菌落數(shù)乘2代表整塊平板的菌落數(shù)

 

另外,當(dāng)所有稀釋度的平板均無細(xì)菌生長,則檢測報告應(yīng)以最低稀釋度報出,如最低稀釋度為1,則報為<1;若最低稀釋度為1:10,則報為<10,而不能報為「未檢出」。


 

編輯:songjiajie2010

 
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