當下,市面上實驗室試劑和耗材琳瑯滿目,質量、價格等也是參差不齊,究竟什么樣的試劑與耗材才是對保證實驗結果準確無誤的呢?作為實驗人員又應該如何選擇呢?首先,就是方法的適用性,不同的實驗方法,選擇不同的試劑與耗材,這是選擇的前提,其次,就要考慮質量和價格,我們后說質量與價格,不是說他們不重要,而這是一個先后的順序,三者同樣重要,少考慮了哪一樣都將是不明智的選擇。別急,干貨來了,咱們往下看。
化學試劑是進行化學研究、成分分析的相對標準物質,是科技進步的重要條件,廣泛用于物質的合成、分離、定性和定量分析。在工廠、學校、醫(yī)院和研究所的日常工作中,都離不開化學試劑。
首先,我們要了解實驗的化學試劑的分類。
該類試劑為我國國家標準所規(guī)定,適用于檢驗、鑒定、檢測。
基準試劑(JZ,綠標簽):作為基準物質,標定標準溶液。
優(yōu)級純(GR,綠標簽):主成分含量很高、純度很高,適用于精確分析和研究工作,有的可作為基準物質。
分析純(AR,紅標簽):主成分含量很高、純度較高,干擾雜質很低,適用于工業(yè)分析及化學實驗。
化學純(CP,藍標簽):主成分含量高、純度較高,存在干擾雜質,適用于化學實驗和合成制備。
實驗純(LR,黃標簽):主成分含量高,純度較差,雜質含量不做選擇,只適用于一般化學實驗和合成制備。
教學試劑:可以滿足學生教學目的,不至于造成化學反應現(xiàn)象偏差的一類試劑。
指定級(ZD):該類試劑是按照用戶要求的質量控制指標,為特定用戶訂做的化學試劑。
高純試劑(EP):包括超純、特純、高純、光譜純,配制標準溶液。此類試劑質量注重的是在特定方法分析過程中可能引起分析結果偏差,并對成分分析或含量分析產生干擾的雜質含量,但對主含量不做很高要求。
色譜純(GC):氣相色譜分析專用。質量指標注重干擾氣相色譜峰的雜質。主成分含量高。
色譜純(LC):液相色譜分析標準物質。質量指標注重干擾液相色譜峰的雜質。主成分含量高。
指示劑(ID):配制指示溶液用。質量指標為變色范圍和變色敏感程度。可替代CP,也適用于有機合成用。
生化試劑(BR):配制生物化學檢驗試液和生化合成。質量指標注重生物活性雜質。可替代指示劑,可用于有機合成。
生物染色劑(BS):配制微生物標本染色液。質量指標注重生物活性雜質。可替代指示劑,可用于有機合成。
光譜純(SP):用于光譜分析。分別適用于分光光度計標準品、原子吸收光譜標準品、原子發(fā)射光譜標準品。
合成試劑:就是在標明成分主含量的前提下,嚴格給出該產品的有關各種物理常數(shù)的一類化學試劑。
化學試劑的選用應以分析要求為主,包括分析任務、分析方法、對結果準確等為依據(jù),來選用不同等級的試劑。如痕量分析要選用高純或優(yōu)級純試劑,以降低空白值和避免雜質干擾。在以大量酸堿進行樣品處理時,其酸堿也應選擇優(yōu)級化學純。同時,對所用的純水的制取方法和玻璃儀器的洗滌方式也應有特殊要求。作仲裁分析也常選用優(yōu)級純、分析純試劑。一般車間控制分析,選用分析純、化學純試劑。某些制備實驗、冷卻浴或加熱的藥品,可選用工業(yè)品。
不同分析方法對試劑有不同要求。如絡合滴定,最好用分析純試劑和去離子水,否則因試劑后水中的雜質金屬離子封閉指示劑,使滴定終點難以觀察。
另一方面,GC-MS,HPLC,UPLC和 LC-MS等應用,需要特定的或高度純化的溶劑級別,以滿足痕量分析的嚴格性能要求。這樣也保證用戶得到最高的儀器靈敏度,同時避免因使用低質量溶劑導致儀器中有殘留引起的停機清洗。使用高質量溶劑的好處還包括減少重復工作、提高精密度和準確度、提高儀器性能、增加重現(xiàn)性以及減少儀器配件和提高分析效率等。盡管這些高純度溶劑的成本會比低級別的產品稍高,但這些成本可以從上述好處中得到抵消。
用途:用于液相色譜(LC)樣品制備、LC樣品分析、LC-MS分析
- 極低的農殘背景值(≤5 pg/ml ),不揮發(fā)性組分極少
- GC控制(ECD-PND檢測)質量可靠,穩(wěn)定性高
- 適用于分析有機氯農藥、有機磷農藥、多氯聯(lián)苯
- (PCBs)及其他用GC/ECD和GC/PND檢測的化合物
- 符合各種殺蟲劑殘留量分析的要求和對低揮發(fā)性雜質的要求
用途:用于氣相色譜檢測(ECD、PND),用于有機氯、有機磷農藥,PCBs及其他用GC/ECD和GC/PND檢測的化合物。
符合國際標準要求,金屬元素雜質含量低(大多是ppm級)。用途:優(yōu)級純試劑可用于大多數(shù)常規(guī)實驗,這類產品還可應用于生產領域。
特純(extra pure)或者合成(for synthesis)級別試劑的質量標準能夠滿足實驗室常規(guī)溶液的配置或標準化生產使用(藥物合成原材料等),通常只檢測一些重要應用的參數(shù),比如,純度、IR參數(shù)、水分含量和醚含量以及過氧化物成分。氘代溶劑廣泛應用于化學研究領域,對于分析有機物分子結構的重要方法--核磁共振波譜法是不可缺少。用途:核磁共振實驗可以提供原子同其他分子中的原子的關聯(lián)信息,包括分子的空間取向、三維空間結構。在蛋白質組學、染色體組學、藥物研究領域有廣泛的應用。NMR對所用溶劑的氘代度反應很敏感,如用200兆赫光譜,使用氘代度在99.5%~99.8%就足夠了,如果提高設備的等級,例如用600兆赫光譜,則需要更高氘代度的溶劑。基準化合物必須是測試精度范圍內的純物質;基準溶液被用于檢驗和校準當量溶液、pH緩沖溶液;只有這樣的物質才能反映檢驗測定當量溶液。衍生法指借助化學反應將待測組份接上某種特定基團,從而改善其檢測靈敏度和分離效果的方法。利用化學衍生反應達到改變化合物特性的目的,使其更適合于特定分析的過程,在儀器分析中被廣泛應用。氣相色譜用:為了增加樣品的揮發(fā)度或提高檢測靈敏度;高效液相色譜用:與樣品組份進行化學反應,反應的產物有利于色譜檢測或分離。紫外光譜用:使被測化合物帶上特定基團,具有紫外吸收。紅外光譜用:使被測化合物鍵合特定基團,具有紅外吸收。
雖然化學試劑必須按照國家標準進行檢驗合格后才能出廠銷售,但不同廠家原料和工業(yè)生產的試劑在性能上有時有顯著差異。甚至同一廠家,不同的同一類試劑,其性質也很難完全一致,因此,在某些要求較高的分析中,不僅要考慮試劑的等級,還應注意生產廠家、生產批號等。
說完了實驗室試劑的選取辦法,接下來咱們再聊一聊如何選取實驗室耗材,因為實驗室耗材眾多,只選取其中幾個常見的實驗室耗材,與小伙伴們聊一聊。
關于萃取柱使用時的常見問題,一般有回收率低、重現(xiàn)性差、凈化效果不佳、流速過快過慢這幾大方面,下面我們一一說明:
判斷方法:空白溶劑加標,回收上樣液和淋洗液,若實際檢測濃度超過含量的5%,說明保留不足。
|
|
|
|
|
|
|
|
操作過程中,小柱發(fā)生“干涸”現(xiàn)象 |
重新進行活化/平衡,保證小柱在淋洗結束前不能發(fā)生“干涸”現(xiàn)象 |
判斷方法:空白溶劑加標,回收上樣液和淋洗液,沒有檢出目標物;但回收洗脫液,回收率也不高。
判斷方法:空白溶劑加標,回收上樣液,淋洗液沒有檢出目標物;回收洗脫液,回收率正常。
|
|
|
|
|
改變提取和轉移方式,減少加熱溫度,受PH影響較大的化合物可加入緩沖鹽調節(jié)PH等 |
|
|
|
|
|
|
|
|
2、重現(xiàn)性差的原因及對策
|
|
|
|
|
改變整個前處理方法,加入內標或與基質加標數(shù)據(jù)做對比 |
|
|
|
|
3、凈化效果不佳的對策
|
|
|
|
|
|
|
|
|
使用手動固相萃取柱裝置,通過調節(jié)止回閥,氣門,抽負壓來調節(jié)流速 |
|
|
|
|
|
|
|
調節(jié)止回閥和氣門,控制真空表壓力恒定在一定范圍內 |
所以,選擇合適的萃取柱對檢測結果的準確性有著至關重要的作用。一般從兩方面進行考量:吸附劑和柱規(guī)格。適宜的吸附填料可以讓干擾物質與目標組分得到良好的分離,并滿足回收要求。而吸附劑所能吸附的化合物質量是有限的,一旦樣品量過大,則會出現(xiàn)“超載”,使得目標物直接“穿透”萃取柱不被保留。
吸附劑主要可根據(jù)目標化合物性質和基質性質進行選擇。吸附劑的選擇則大致可由以上兩種方式進行選擇,對于具體實例,可依據(jù)“區(qū)分目標化合物和主要干擾物”的原則進行選擇。
選擇出適宜的吸附劑后,還需要根據(jù)檢定所需的樣品量選擇合適的柱規(guī)格。由于萃取柱的吸附劑能吸附的化合物質量是有限的,一旦超過了這個數(shù)值,目標物就不能被有效保留,使得洗脫效果大打折扣。因此,根據(jù)樣品中的組份量選擇合適的柱規(guī)格,是很有必要的。以下給出了萃取柱的上樣容量及洗脫參數(shù),以供參考: