為了對(duì)水體汞(甲基汞)污染所引起的健康危害進(jìn)行科學(xué)評(píng)價(jià),統(tǒng)一診斷標(biāo)準(zhǔn),以推動(dòng)防治和污染治理工作,特制定本標(biāo)準(zhǔn)。
1 診斷原則
根據(jù)水體汞污染水平、食用被汞污染的魚貝類食物的歷史、體內(nèi)汞蓄積狀況、以及臨床表現(xiàn)和化驗(yàn)資料,進(jìn)行綜合分析,排除其他疾病,方可診斷。
2 診斷及分級(jí)
2.1甲基汞吸收
頭發(fā)中總汞值超過10μg/g,其中甲基汞值超過5μg/g者。
2.2觀察對(duì)象
在汞吸收的基礎(chǔ)上,出現(xiàn)下列三項(xiàng)體征當(dāng)中的1~2項(xiàng)陽性體征者。
a.四肢周圍型(手套、襪套型)感覺減退。
b.向心性視野縮小15~30度。
c.高頻部感音神經(jīng)性聽力減退11~30dB。
2.3慢性甲基汞中毒
在汞吸收的基礎(chǔ)上,具有下列a、b、c三項(xiàng)體征者,可診斷為慢性甲基汞中毒。
a.四肢周圍型(手套、襪套型)感覺減退。
b.向心性視野縮小15~30度,或有顳側(cè)月芽狀缺損到30度者。
c.高頻部感音神經(jīng)性聽力減退l1~30dB。
d.具有上述三項(xiàng)體征,但發(fā)汞低于10μg/g以下時(shí),可做驅(qū)汞試驗(yàn),驅(qū)汞后尿中總汞值超過20μg/L,其中甲基汞超過10μg/L者,方可診斷。
3 處理原則
禁止食用被甲基汞污染水體的魚貝類食物。
3.1 甲基汞吸收
定期檢查發(fā)汞。
3.2 觀察對(duì)象
定期復(fù)查。
3.3 慢性甲基汞中毒
適當(dāng)休息、驅(qū)汞治療、定期復(fù)查。
A.1詢問:四肢遠(yuǎn)端麻木感、頭痛、頭暈、無力、健忘、睡眠障礙、流涎、多浮等,以及有無其他中毒史和其他神經(jīng)病史。
A.2痛覺:按目前普遍應(yīng)用的針刺法,在兩側(cè)肢體相應(yīng)部位上對(duì)比檢查,由遠(yuǎn)端向近端檢查,讓受檢者回答有無痛覺減退。
A.3溫度覺:用金屬管分別盛10~15℃水測(cè)冷覺;用金屬管盛50~55℃水測(cè)熱覺。進(jìn)行兩側(cè)肢體遠(yuǎn)端、近端對(duì)比檢查,讓受檢者區(qū)別涼熱程度。
A.4觸覺:用棉絮進(jìn)行兩側(cè)肢體遠(yuǎn)端、近端對(duì)比檢查,讓受檢者回答有無觸覺減退。
A.5振動(dòng)覺:以C 128振的音叉進(jìn)行雙側(cè)遠(yuǎn)端、近端對(duì)比檢查,讓受檢者回答振動(dòng)感的程度。
A.6小腦功能檢查:檢查構(gòu)音、眼球震顫、走直線、昂白(Romberg′s)氏征、指鼻、輪替及跟膝脛試驗(yàn)等。
A.7 有條件可檢查肌電、神經(jīng)傳導(dǎo)速度等。
附錄B視野檢查法(補(bǔ)充件)
B.1儀器
用光點(diǎn)投射視野計(jì)或330mm半徑的弓形視野計(jì)。視標(biāo)3~5mm白色視標(biāo)。
B.2 方法步驟
a.用光點(diǎn)投射視野計(jì)檢查,在暗室進(jìn)行,用弓形視野計(jì)時(shí),爭(zhēng)取在固定人工照明下進(jìn)行。受檢者將下頜置于視野計(jì)頦架上遮蓋一眼,分別檢查。
b.用3~5mm白視標(biāo)分別檢查8~12個(gè)方位。
c.記錄于視野紙上,以備判斷。
B.3 注意事項(xiàng)
a.視野檢查背景光應(yīng)為“明適應(yīng)”狀態(tài),選用30lx左右,視標(biāo)光斑亮度約為背景光的一倍。
b.視野首選3mm直徑。如果視野已表現(xiàn)為較重的向心性縮小,可收用5或10mm的視標(biāo)重查。此時(shí)可能只呈現(xiàn)顳側(cè)月芽狀缺損(表明矩狀裂前端病變較重),有助于對(duì)本病的診斷。
c.檢查視野的各項(xiàng)條件,在各次檢查中統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。
d.檢查時(shí)視標(biāo)由里向外或由外向里移動(dòng),其結(jié)果相差在10度以內(nèi)者,則取用多次所在點(diǎn)位,如果相差在10度以上者,應(yīng)考慮為視標(biāo)移動(dòng)太快或病人反應(yīng)遲鈍,有待追隨復(fù)查。
e.有瞼下垂或上瞼皮膚松弛影響檢查結(jié)果時(shí),應(yīng)協(xié)助處理后再行檢查。
B.4 其他
a.在有條件情況下,對(duì)視野明顯缺損者,建議做ERG,暗適應(yīng)等。
b.為了解視皮質(zhì)功能狀態(tài),建議用VEP!
C.1測(cè)聽儀器
純音聽力計(jì)。
C.2方法
a.檢查外耳及中耳情況,以排除傳音性聾。詳細(xì)詢問病史,排除其他原因所致的感音神經(jīng)性聾。
b.在隔音條件下分別檢測(cè)兩耳聽閾,先測(cè)氣導(dǎo),后測(cè)骨導(dǎo),檢測(cè)時(shí),以5dB為一檔,檢測(cè)骨時(shí)必須加適量噪聲遮蓋。
c.有條件可查語言測(cè)聽的最大清晰度(PBmax),Bekesy測(cè)聽、聲阻抗測(cè)聽和耳蝸電圖及腦干電測(cè)聽。
C.3記錄方法
檢查結(jié)果按全國(guó)通用符號(hào)標(biāo)記。右耳氣導(dǎo)符號(hào)為“O”左耳為“x”。右耳骨導(dǎo)符號(hào)為“[”, 左耳為“]”。氣導(dǎo)以實(shí)線相聯(lián),骨導(dǎo)以虛線相聯(lián),制成聽力曲線。
C.4 檢查標(biāo)準(zhǔn)
慢性甲基汞中毒引起的聽力損失在高頻部(2、4、6、8 kHz),高頻部平均損失11~30dB為輕度;31~60dB為中度;61~90dB為重度; 91dB以上為全聾!
D.1原理
汞蒸氣對(duì)波長(zhǎng)253.7nm的紫外光具有強(qiáng)烈的吸收作用,試樣經(jīng)適當(dāng)處理后,將各種形態(tài)的汞轉(zhuǎn)變成汞離子,用氯化亞錫將汞離子還原成元素汞,再用測(cè)汞儀進(jìn)行測(cè)定,汞濃度與吸收值成正比。
D.2方法一
加氧燃燒-冷原子吸收法。
D.2.1儀器
a.測(cè)汞儀(F732型系列)。
b.管式電爐。
D.2.2試劑
D.2.2.1 30%氯化亞錫:取30g氯化亞錫(SnCl2·2H2O)溶于100ml 1N硫酸溶液中,或加10ml濃鹽酸,溶解后用去離子水稀釋至100ml(發(fā)黃的氯化亞錫不能用)。
D.2.2.2吸收液:2%高錳酸鉀溶液和10%硫酸溶液,臨用時(shí)等體積混合。
D.2.2.3汞標(biāo)準(zhǔn)液:
a.汞標(biāo)準(zhǔn)貯備液:稱取二氯化汞(分析純)0.1354g,用1N硫酸溶解并稀釋至100ml。此溶液1.00ml等于1.00mg汞。
b.汞標(biāo)準(zhǔn)使用液:用1N硫酸把貯備液稀釋成1.00ml含有0.10μg汞。此溶液使用前配制。
D.2.3分析步驟
D.2.3.1樣品處理:準(zhǔn)確稱取處理好的發(fā)樣0.1~0.2g置于石英舟中(上蓋一小塊濾紙),將石英舟放入管式電爐的石英管里,石英管的一端與氧氣瓶連接,另一端與盛有20ml吸收液的吸收管連接。如下:
將爐溫控制在750±50℃通氧氣(流速2L/min),分段燃燒3min,樣品中的汞富集于吸收液中,備作測(cè)定。 D.2.3.2測(cè)定:準(zhǔn)確吸取一定體積吸收液(燃燒后的)于汞反應(yīng)瓶中,加入2m1 30%氯化亞錫溶液后立即塞緊瓶塞,開動(dòng)循環(huán)泵,讀取最大吸收值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求出汞含量。 D.2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:分別吸取0.00,0.50,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00ml汞標(biāo)準(zhǔn)使用液于汞反應(yīng)瓶中,配成的標(biāo)準(zhǔn)系列為0.00,0.05,0.10,0.20,0.30,0.40,0.50μg汞,以1N硫酸溶液稀釋到一定體積,加入2ml 30%氯化亞錫溶液,立即塞緊瓶塞,開動(dòng)循環(huán)泵,讀取最大吸收值。以吸收值為縱坐標(biāo),汞量(μg)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,繪制時(shí)應(yīng)減去空白值。
D.2.5計(jì)算
汞(Hg,μg/L)=讀取汞量(μg)×吸收液總體積(ml)/[發(fā)樣重量(g)×測(cè)定取試樣溶液體積(ml)……………………(1)
D.2.6注意事項(xiàng)
a.石英器皿在使用前或測(cè)定后必須清洗。
b.測(cè)定時(shí)石英管出口及連接部位塞緊,避免漏氣。
D.3 方法二
三酸混合消解法。
D.3.1儀器
a.測(cè)汞儀(F-732型)。
b.50ml汞發(fā)生管。
c.100ml三角瓶。
d.漏斗。
e.可調(diào)電爐。
D.3.2試劑
a.硝酸,優(yōu)級(jí)純。
b.硫酸,優(yōu)級(jí)純。
c.高氯酸,優(yōu)級(jí)純。
d.5%高錳酸鉀溶液:稱取5g優(yōu)級(jí)純高錳酸鉀溶于100ml去離子水中。
e.10%鹽酸羥胺溶液:稱取分析純鹽酸羥胺10g溶于去離子水中,并稀釋至100ml。
f.30%氯化亞錫溶液:同D.2.2.1。
g.汞標(biāo)準(zhǔn)溶液:同方法一。
D.3.3分析步驟
D.3.3.1樣品消化:稱取清洗過的發(fā)樣50mg,放入100ml三角瓶中,同時(shí)做空白試驗(yàn),加入硝酸5ml。放入一些小玻璃球,三角瓶放在電熱板上加熱5min,加硫酸5ml繼續(xù)加熱10min,再加高氯酸1ml加熱5min取下,冷卻后加入少量去離子水,滴加5%高錳酸鉀呈紫紅色,將此溶液洗入50ml汞發(fā)生管備用。
D.3.3.2樣品測(cè)定:往消化液中加入10%鹽酸羥胺0.25ml,使高錳酸鉀的紫色消失,加入20%氯化亞錫5ml,立刻測(cè)定,讀取測(cè)得值,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出汞含量。
D.3.4標(biāo)準(zhǔn)曲線制作
取0.10μg/ml汞標(biāo)準(zhǔn)使用液0,0.1,0.3,1.0,1.2,1.5,2.0ml。分別置于50ml汞發(fā)生管中,加入少量去離子水,然后加入5ml硫酸,1滴高錳酸鉀,用去離子水稀釋到50ml,加入10%鹽酸羥胺0.25ml,使高錳酸鉀的紫色消失,加入5ml 20%氯化亞錫,進(jìn)行測(cè)定。以測(cè)得值為縱坐標(biāo),汞含量為橫坐標(biāo),制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。
D.3.5 計(jì)算
總汞(μg/g)=查出的汞含量(μg)/樣品重量(g)…………………………………(2)
D.3.6 注意事項(xiàng)
D.3.6.1 硝酸加入樣品后,加熱溫度控制在130℃以下,使反應(yīng)緩慢進(jìn)行,加入硫酸、高氯酸后,消化溫度控制在250℃左右,以二氧化硫白煙產(chǎn)生為消化終點(diǎn),立刻取下,否則會(huì)造成汞損失。
D.3.6.2 注意玻璃容器對(duì)汞的吸收。所有的玻璃容器,特別是新用的玻璃容器,使用前用熱高錳酸鉀-硫酸溶液洗二次,再用去離子水沖洗干凈。
附錄E頭發(fā)及尿中甲基汞含量的測(cè)定方法(補(bǔ)充件)
E.1 原理
用鹽酸浸提出樣品中的甲基汞,在pH=3條件下,經(jīng)疏基棉富集,用2N鹽酸解析,以苯萃取。采用氣相色譜儀測(cè)定苯萃取液中的甲基汞。 E.2 儀器和試劑
E.2.1 儀器
a.氣相色譜儀:具電子捕獲檢測(cè)器。
b.疏基棉管:自制,內(nèi)徑8~10mm玻璃管,長(zhǎng)10~15cm,一端拉細(xì),一端平口。
E.2.2 試劑
a.苯:優(yōu)級(jí)純,色譜圖上無干擾氯化甲基汞的雜峰。
b.鹽酸;優(yōu)級(jí)純。
c .氯化甲基汞標(biāo)準(zhǔn)溶液。
d.巰基棉:取50ml硫代乙醇酸(HS-CH2COOH),加入35ml乙酸酐,16ml 36%乙酸,0.15ml濃硫酸,5ml去離子水于具塞三角燒瓶中混勻。加入15g脫脂棉浸透,加塞放在37~39℃的烘箱中烘四天,取出用蒸餾水洗至中性,擠掉水分后攤在瓷盤上,置于39℃烘箱中烘干(注意避免污染),成品保存于棕色廣口瓶中備用。新制備的疏基棉需用甲基汞標(biāo)樣進(jìn)行回收率實(shí)驗(yàn),回收率在95%以上者方可應(yīng)用。
e.硫酸銅溶液:溶解50g CuSO4·5H20于200ml去離子水中。
E.3:操作步驟
E.3.1樣品提取
E.3.1.1頭發(fā):準(zhǔn)確稱取經(jīng)過清洗的發(fā)樣0.1~0.5g,放人20ml離心管中,加入5m1 2N鹽酸,浸泡過夜,用去離子水稀釋至20ml左右,投入1~2g氯化鈉,將清液傾人分液漏斗中,調(diào)節(jié)pH=3。以下按濃縮步驟進(jìn)行。
E.3.1.2人尿:取尿樣50~100ml于分液漏斗中,用濃鹽酸酸化至1N,加入幾滴硫酸銅溶液,10min后用氫氧化鈉溶液和稀鹽酸調(diào)節(jié)pH=3,以下操作按濃縮步驟進(jìn)行。
E.3.2濃縮
在分液漏斗下端接上巰基棉管,令提取液通過巰基棉并以每分鐘40滴的速度流出。流完后用蒸餾水沖洗分液漏斗管壁。最后用二聯(lián)球加壓吹出最后一滴。
取下巰基棉管。將其放在具塞比色管上,加入2ml 2N鹽酸,令其自然流下,用玻璃棒擠凈殘存酸液。
準(zhǔn)確取1ml純苯,加入上述比色管中,振搖3min,以萃取鹽酸中的甲基汞,待分層后即可取上層苯液進(jìn)行色譜測(cè)定。
E.4 色譜條件
a.固定液:國(guó)產(chǎn)7%丁二酸乙二醇聚酯或7%PEG-20M。
b.擔(dān)體:上試201酸洗紅色擔(dān)體(預(yù)涂5%NaCl)或Chromosorb W 60~80目。
c.色譜柱:1m×4mm不銹鋼柱或玻璃柱。
d.柱溫:165~170℃。
e.檢測(cè)器溫度:175~180℃。
f.氣化室溫度:210℃。
g.出口溫度:150℃。
h.載氣:高純氮,流速70mL/min。
E.5 結(jié)果計(jì)算
甲基汞(μg/g或μg/L)=標(biāo)準(zhǔn)甲基汞量(μg)×樣品峰高(mm)×萃取液總體積(mL)/[標(biāo)準(zhǔn)峰高(mm)×進(jìn)樣體積(ml)×發(fā)樣重量(g)或尿樣體積(L)]
附錄F尿中總汞含量的測(cè)定方法(補(bǔ)充件)
F.1 原理
在堿性溶液中鎘離子催化下,尿中各種形態(tài)的汞能迅速地被氯化亞錫還原為元素汞,用測(cè)汞儀測(cè)定其總汞含量。
E.2 儀器 測(cè)汞儀: F732型,附帶10~15ml翻泡瓶。
F.3 試劑
a. 30%氫氧化鈉溶液(優(yōu)級(jí)純)。
b. 氯化亞錫。硫酸鋼鎘度劑:取氯化亞錫(分析純)10g,加鹽酸(優(yōu)級(jí)純)5m1,溶解后加去離子水至20ml,加入硫酸鎘(分析純)1.6g。臨用前配制。
c. 抗泡劑:磷酸三丁酯或滅泡劑(天津助劑廠)。
d. 2%L-半胱胺酸溶液。
e. 汞標(biāo)準(zhǔn)液:1m1含0.1g汞(Hg2+)。
F.4測(cè)定
吸取尿樣5-10ml于翻泡瓶中,加30%氫氧化鈉2ml,2%L-半胱胺酸0.25m1,抗泡劑1~2滴,氯化亞錫-硫酸銅試劑1m1,立即塞緊瓶塞,開動(dòng)循環(huán)泵,讀取最大吸收值。
F.5標(biāo)準(zhǔn)曲線制作
取汞標(biāo)準(zhǔn)液(0~0.15μgHg2+),按上述測(cè)定方法,測(cè)定其吸收值,以汞標(biāo)準(zhǔn)液濃度為橫坐標(biāo),吸收值為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。
F.6 結(jié)果計(jì)算
尿汞含量(μg/L)=相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)液汞的微克數(shù)/尿樣量(L)
G.1本標(biāo)準(zhǔn)的使用范圍
凡長(zhǎng)期大量食用被汞污染水體的魚貝類食物者,可按本標(biāo)準(zhǔn)診斷及處理。
G.2幾點(diǎn)說明
G.2.1慢性甲基汞中毒診斷,應(yīng)由省級(jí)以上的專門診斷組織進(jìn)行。
G.2.2長(zhǎng)期大量食用汞污染魚
長(zhǎng)期是指經(jīng)常食用汞污染魚達(dá)半年以上。大量是指平均每天食用汞污染魚500g以上。汞污染魚是指在汞污染水體中的魚貝類汞含量超過我國(guó)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定0.3μg/g。
G.2.3驅(qū)汞試驗(yàn)
用5%二巰基內(nèi)磺酸鈉5ml一次肌肉注射后,收集24h尿量,測(cè)尿中總汞及甲基汞含量。
G.2.4采發(fā)樣部位及清洗方法
采取后發(fā)際貼頭皮的頭發(fā)。
發(fā)樣清洗:將發(fā)樣置于10%中性洗滌劑中浸泡10min,振搖洗滌后,再依次用自來水、去離子水漂洗,干燥后剪成1~3mm長(zhǎng)備用。如果發(fā)樣油脂較多,可將按上述方法清洗后的發(fā)樣,浸泡于乙醚(或丙酮)中,攪拌10min后取出晾干備用。
附加說明:
本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部提出。
本標(biāo)準(zhǔn)由白求恩醫(yī)科大學(xué)、哈爾濱醫(yī)科大學(xué)負(fù)責(zé)起草。
本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部委托白求恩醫(yī)科大學(xué)、哈爾濱醫(yī)科大學(xué)負(fù)責(zé)解釋。