我們都知道，微生物無(wú)處不在，而且微生物個(gè)體十分小，肉眼無(wú)法直接進(jìn)行觀察，必須要借助顯微鏡進(jìn)行觀察，一些不易觀察的菌還需要借助染色之后才能清楚看到。

    今天我們就來(lái)探討一下

    CFU到底是什么?

菌落總數(shù)往往采用的是平板計(jì)數(shù)法，經(jīng)過培養(yǎng)后數(shù)出平板上所生長(zhǎng)出的菌落個(gè)數(shù)，從而計(jì)算出每毫升或每克待檢樣品中可以培養(yǎng)出多少個(gè)菌落，于是以CFU/ml或CFU/g報(bào)告。

PART.01定義

我們先來(lái)看看CFU的國(guó)際定義。

CFU:Acolony-forming unit(CFU,cfu,CFu)is a unit used in microbiology to estimate the number of viable bacteria or fungal cells in a sample.（菌落形成單位是指微生物學(xué)中用于估算樣品中活的細(xì)菌或者真菌數(shù)量的單位。）

具體來(lái)說，CFU就是在活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)時(shí)，由單個(gè)菌體或聚集成團(tuán)的多個(gè)菌體在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖所形成的集落，指的是單位體積中的細(xì)菌、霉菌、酵母等微生物的群落總數(shù)。

CFU是形成菌落的菌落個(gè)數(shù)，不等于細(xì)菌個(gè)數(shù)。（比如兩個(gè)相同的細(xì)菌靠得很近或貼在一起，那么經(jīng)過培養(yǎng)這兩個(gè)細(xì)菌將會(huì)形成一個(gè)菌落，此時(shí)就是2個(gè)細(xì)菌，1CFU）。

PART.02CFU計(jì)數(shù)的要求

理論上，一個(gè)活細(xì)菌可以在條件合適的固體表面上形成一個(gè)菌落，但是吸附于微小顆粒上的兩個(gè)以上菌體或粘連在一起的菌團(tuán)可能共同形成一個(gè)菌落，而且不同環(huán)境因素作用下，細(xì)菌的生活能力各不相同，會(huì)影響其在該條件下形成菌落的能力，致使形成的菌落數(shù)遠(yuǎn)低于實(shí)際的活菌數(shù)。

這種方式得出的數(shù)據(jù)并不能直接等于樣品中的微生物數(shù)量，而是一種認(rèn)可的估算，這就要求操作者在進(jìn)行涂布平板或者接種之前把微生物活菌進(jìn)行充分的均勻分散。但是一些鏈球菌、球菌等天生就不能單細(xì)胞分散均勻。

另外，考慮到各類樣品的微生物含量不一，為使CFU區(qū)間按照國(guó)標(biāo)計(jì)算方法有效落在30-300之間，必須要保證合理的稀釋倍數(shù)，過多或者過少都不合適。

PART.03 CFU是一種估算方法

使用菌落形成單位進(jìn)行計(jì)數(shù)與一般的計(jì)數(shù)方式不同，一般在顯微鏡下計(jì)算細(xì)菌數(shù)量，會(huì)將活菌與死菌都計(jì)入其中，但是CFU計(jì)數(shù)只有是活菌才能在平板上生長(zhǎng)形成菌落，因此只計(jì)算活菌數(shù)量。理論上只要分散足夠均勻，一個(gè)活細(xì)胞形成一個(gè)CFU，但是實(shí)驗(yàn)中為了分散細(xì)菌，經(jīng)常會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌死亡，從而無(wú)法生長(zhǎng)成單菌落。

同時(shí)，微生物最終能否在平板上生長(zhǎng)成一個(gè)菌落，還和培養(yǎng)基本身、培養(yǎng)時(shí)的條件、微生物自身的狀態(tài)等各種各樣的因素有關(guān)。這就注定了CFU不能是一種精確計(jì)數(shù)的計(jì)量方式。

總之，CFU是一種估算方法，選擇CFU進(jìn)行計(jì)量表示時(shí)，就代表使用者已認(rèn)同它的不精確性，需要接受這種測(cè)量方式的誤差。最后舉例來(lái)說，若定量菌種的菌種數(shù)量標(biāo)示的是“CFU”，代表是用培養(yǎng)基法來(lái)計(jì)數(shù)的。若定量菌種是用流式細(xì)胞儀等其他方式計(jì)數(shù)，標(biāo)示“個(gè)”更為合理。

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