高分子磁性微球是指通過適當(dāng)?shù)姆椒ㄊ褂袡C(jī)高分子與無機(jī)磁性顆粒結(jié)合起來形成的具有一定磁性的高分子微球。高分子磁性微球在生物化學(xué)中有廣闊的應(yīng)用前景。
一. 固定化酶
固定化酶是指利用物理吸附或化學(xué)結(jié)合法將自由酶固定到載體上,以提高酶的操作穩(wěn)定性和反復(fù)回收利用酶的技術(shù)。
游離酶在生物化學(xué)和生物醫(yī)用化學(xué)方面的應(yīng)用往往不盡如人意, 而將酶固定在磁性載體上則有許多有點(diǎn):可以提高酶的熱穩(wěn)定性、存放穩(wěn)定性和操作穩(wěn)定性; 改善酶的生物相容性、免疫活性、親疏水性;固定化酶從反應(yīng)體系中分離和回收簡便,可重復(fù)使用,而且產(chǎn)物不受污染易于精制;若將多種酶結(jié)合在微球上還可進(jìn)行多酶反應(yīng);可利用外部磁場控制磁性材料固定化酶的運(yùn)動和方向,從而代替?zhèn)鹘y(tǒng)的機(jī)械攪拌方式,提高固定化酶的催化效率;固定化酶再生性好, 使用效率高;可用于連續(xù)生產(chǎn),降低生產(chǎn)成本;可在外加磁場作用下快速分離,適于大規(guī)模連續(xù)化操作。
一般來說, 磁性載體的性質(zhì)對固定化酶的應(yīng)用十分重要, 它需滿足一定的條件:
1. 磁響應(yīng)性要好;
2. 可與生物相容;
3. 能夠提供足夠大的表面積, 使酶反應(yīng)順利進(jìn)行, 降低反應(yīng)基質(zhì)和產(chǎn)物的分散限制;
4. 有一定的機(jī)械強(qiáng)度;
5. 具有再使用性;
6. 帶有反應(yīng)性的功能基團(tuán)。
高分子磁性微球作為固定化酶的載體,已顯示出優(yōu)異的吸附性能、良好的操作穩(wěn)定性及較高的固定效果等優(yōu)點(diǎn),但由于酶在磁性高分子微球表面的纏結(jié)、取向等因素,其穩(wěn)定性和活性往往會降低。
Iman等人將磁性聚苯乙烯微球加入脲酶的磷酸緩沖液中,35℃下水浴攪拌150min,得到固定化酶,這種微球在外部磁場的作用下在流動反應(yīng)器中可以不停地運(yùn)動,磁性微球?qū)θ醮艌鲇休^好的響應(yīng)性,而且本身不會聚集。
二. 免疫分析及測定
免疫分析在現(xiàn)代生物分析技術(shù)中是一種重要的方法,它對蛋白質(zhì)、抗原、抗體及細(xì)胞的定量分析發(fā)揮著巨大作用。磁性高分子微球用于免疫分析,其原理是在磁性高分子微球表面接枝定向吸附于細(xì)菌的抗體,并利用它與原液混合、沉降,在磁場作用下分離、提純,得到吸附于磁性高分子微球上的活細(xì)菌。磁性高分子微球可偶聯(lián)抗體分離帶特定抗原的免疫細(xì)胞,利用磁性高分子微球結(jié)合的抗原或抗體進(jìn)行免疫分析,具有特異性高、分離快、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)。
三. 生物化學(xué)合成
以磁性高分子微球?yàn)檩d體的固相有機(jī)合成技術(shù),不僅可充分發(fā)揮固相合成的優(yōu)勢,而且在反應(yīng)完成后,可迅速地將目標(biāo)產(chǎn)物從剩余反應(yīng)物、副產(chǎn)物及溶劑中方便地分離出來,且不影響產(chǎn)物的性質(zhì)與純度。
一. 固定化酶
固定化酶是指利用物理吸附或化學(xué)結(jié)合法將自由酶固定到載體上,以提高酶的操作穩(wěn)定性和反復(fù)回收利用酶的技術(shù)。
游離酶在生物化學(xué)和生物醫(yī)用化學(xué)方面的應(yīng)用往往不盡如人意, 而將酶固定在磁性載體上則有許多有點(diǎn):可以提高酶的熱穩(wěn)定性、存放穩(wěn)定性和操作穩(wěn)定性; 改善酶的生物相容性、免疫活性、親疏水性;固定化酶從反應(yīng)體系中分離和回收簡便,可重復(fù)使用,而且產(chǎn)物不受污染易于精制;若將多種酶結(jié)合在微球上還可進(jìn)行多酶反應(yīng);可利用外部磁場控制磁性材料固定化酶的運(yùn)動和方向,從而代替?zhèn)鹘y(tǒng)的機(jī)械攪拌方式,提高固定化酶的催化效率;固定化酶再生性好, 使用效率高;可用于連續(xù)生產(chǎn),降低生產(chǎn)成本;可在外加磁場作用下快速分離,適于大規(guī)模連續(xù)化操作。
一般來說, 磁性載體的性質(zhì)對固定化酶的應(yīng)用十分重要, 它需滿足一定的條件:
1. 磁響應(yīng)性要好;
2. 可與生物相容;
3. 能夠提供足夠大的表面積, 使酶反應(yīng)順利進(jìn)行, 降低反應(yīng)基質(zhì)和產(chǎn)物的分散限制;
4. 有一定的機(jī)械強(qiáng)度;
5. 具有再使用性;
6. 帶有反應(yīng)性的功能基團(tuán)。
高分子磁性微球作為固定化酶的載體,已顯示出優(yōu)異的吸附性能、良好的操作穩(wěn)定性及較高的固定效果等優(yōu)點(diǎn),但由于酶在磁性高分子微球表面的纏結(jié)、取向等因素,其穩(wěn)定性和活性往往會降低。
Iman等人將磁性聚苯乙烯微球加入脲酶的磷酸緩沖液中,35℃下水浴攪拌150min,得到固定化酶,這種微球在外部磁場的作用下在流動反應(yīng)器中可以不停地運(yùn)動,磁性微球?qū)θ醮艌鲇休^好的響應(yīng)性,而且本身不會聚集。
二. 免疫分析及測定
免疫分析在現(xiàn)代生物分析技術(shù)中是一種重要的方法,它對蛋白質(zhì)、抗原、抗體及細(xì)胞的定量分析發(fā)揮著巨大作用。磁性高分子微球用于免疫分析,其原理是在磁性高分子微球表面接枝定向吸附于細(xì)菌的抗體,并利用它與原液混合、沉降,在磁場作用下分離、提純,得到吸附于磁性高分子微球上的活細(xì)菌。磁性高分子微球可偶聯(lián)抗體分離帶特定抗原的免疫細(xì)胞,利用磁性高分子微球結(jié)合的抗原或抗體進(jìn)行免疫分析,具有特異性高、分離快、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)。
三. 生物化學(xué)合成
以磁性高分子微球?yàn)檩d體的固相有機(jī)合成技術(shù),不僅可充分發(fā)揮固相合成的優(yōu)勢,而且在反應(yīng)完成后,可迅速地將目標(biāo)產(chǎn)物從剩余反應(yīng)物、副產(chǎn)物及溶劑中方便地分離出來,且不影響產(chǎn)物的性質(zhì)與純度。