手機(jī)版
最佳測(cè)定范圍、校準(zhǔn)曲線(xiàn)及分析空白……這些概念，您都知道嗎？今天，我們?cè)賮?lái)復(fù)習(xí)一下吧。
最佳測(cè)定范圍
最佳測(cè)定范圍（又稱(chēng)有效測(cè)定范圍）
指在限定誤差范圍滿(mǎn)足預(yù)定要求的前提下，特定方法的測(cè)定下限至測(cè)定上限之間的濃度范圍。在此范圍內(nèi)能夠準(zhǔn)確地測(cè)定待測(cè)物質(zhì)的濃度或量。
最佳測(cè)定范圍應(yīng)小于方法的適應(yīng)范圍。對(duì)測(cè)量結(jié)果的精密度（通常以相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示）要求越高，相應(yīng)的最佳測(cè)定范圍越小。
方法的線(xiàn)性范圍
方法的線(xiàn)性范圍是指信號(hào)與樣品濃度呈線(xiàn)性的工作曲線(xiàn)直線(xiàn)部分。通常把相當(dāng)于10倍空白的標(biāo)準(zhǔn)偏差相應(yīng)的濃度定為方法的線(xiàn)性范圍的定量檢測(cè)下限。取工作曲線(xiàn)中高濃度時(shí)，彎曲處作為方法的線(xiàn)性范圍的定量檢測(cè)上限。
好的分析方法要有寬的線(xiàn)性范圍。有的分析方法線(xiàn)性范圍只有一個(gè)數(shù)量級(jí)，有的分析方法線(xiàn)性范圍可達(dá)5~6個(gè)數(shù)量級(jí)。同一分析方法可用常亮、微量、痕量的物質(zhì)分析。
校準(zhǔn)曲線(xiàn)
校準(zhǔn)曲線(xiàn)包括標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和工作曲線(xiàn)，前者用標(biāo)準(zhǔn)溶液系列直接測(cè)量，沒(méi)有經(jīng)過(guò)預(yù)處理過(guò)程，這對(duì)于樣品往往造成較大誤差；而后者所使用的標(biāo)準(zhǔn)溶液經(jīng)過(guò)了與樣品相同的消解、凈化、測(cè)量等全過(guò)程。
凡應(yīng)用校準(zhǔn)曲線(xiàn)的分析方法，都是在樣品測(cè)得信號(hào)值后，從校準(zhǔn)曲線(xiàn)上查得其含量（或濃度）。因此，繪制準(zhǔn)確的校準(zhǔn)曲線(xiàn)，直接影響到樣品分析結(jié)果的準(zhǔn)確與否。此外，校準(zhǔn)曲線(xiàn)也確定了方法的測(cè)定范圍。
校準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制
同一系列被測(cè)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照標(biāo)準(zhǔn)方法規(guī)定的步驟，將被測(cè)物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩芤�。制備好的�?biāo)準(zhǔn)系列和空白，在方法選定的波長(zhǎng)下，測(cè)定吸光度。已被測(cè)物質(zhì)濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
對(duì)標(biāo)準(zhǔn)系列，溶液以純?nèi)軇閰⒈冗M(jìn)行測(cè)量后，應(yīng)先做空白校正，然后繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
標(biāo)準(zhǔn)溶液一般可直接測(cè)定，但如式樣的預(yù)處理較復(fù)雜致使污染或損失不可忽略時(shí)，應(yīng)和試樣同樣處理后再測(cè)定，
校準(zhǔn)曲線(xiàn)的斜率常隨環(huán)境溫度、試劑批號(hào)和貯存時(shí)間等實(shí)驗(yàn)條件的改變而變動(dòng)。
因此，在測(cè)定試樣的同時(shí)，繪制校準(zhǔn)曲線(xiàn)最為理想，否則應(yīng)在測(cè)定試樣的同時(shí)，平行測(cè)定零濃度和中等濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液各兩份，取均值相減后與原校準(zhǔn)曲線(xiàn)上的相應(yīng)點(diǎn)核對(duì)，其相對(duì)差值根據(jù)方法精密度不得大于5%～10%，否則應(yīng)重新繪制校準(zhǔn)曲線(xiàn)。
校準(zhǔn)曲線(xiàn)的檢驗(yàn)
1）線(xiàn)性檢驗(yàn)：即檢驗(yàn)校準(zhǔn)曲線(xiàn)的精密度。對(duì)于以4～6個(gè)濃度單位所獲得的測(cè)量信號(hào)值繪制的校準(zhǔn)曲線(xiàn)，分光光度法一般要求其相關(guān)系數(shù) | r | ≥0.9990，否則應(yīng)找出原因并加以糾正，重新繪制合格的校準(zhǔn)曲線(xiàn)。
2）截距檢驗(yàn)：即檢驗(yàn)校準(zhǔn)曲線(xiàn)的準(zhǔn)確度，在線(xiàn)性檢驗(yàn)合格的基礎(chǔ)上，對(duì)其進(jìn)行線(xiàn)性回歸，得出回歸方程y=a+bx ，然后將所得截距a與0作t檢驗(yàn)，當(dāng)取95%置信水平，經(jīng)檢驗(yàn)無(wú)顯著性差異時(shí)，a可做0處理，方程簡(jiǎn)化為y=bx，移項(xiàng)得x=y/b。在線(xiàn)性范圍內(nèi)，可代替查閱校準(zhǔn)曲線(xiàn)，直接將樣品測(cè)量信號(hào)值經(jīng)空白校正后，計(jì)算出試樣濃度。
當(dāng)a與0有顯著性差異時(shí)，表示校準(zhǔn)曲線(xiàn)的回歸方程計(jì)算結(jié)果準(zhǔn)確度不高，應(yīng)找出原因予以校正后，重新繪制校準(zhǔn)曲線(xiàn)并經(jīng)線(xiàn)性檢驗(yàn)合格。在計(jì)算回歸方程，經(jīng)截距檢驗(yàn)合格后投入使用。
回歸方程如不經(jīng)上述檢驗(yàn)和處理，就直接投入使用，必將給測(cè)定結(jié)果引入差值相當(dāng)于解決a的系統(tǒng)誤差。
3）斜率檢驗(yàn)：即檢驗(yàn)分析方法的靈敏度，方法靈敏度是隨實(shí)驗(yàn)條件的變化而改變的。在完全相同的分析條件下，僅由于操作中的隨機(jī)誤差導(dǎo)致的斜率變化不應(yīng)超出一定的允許范圍，此范圍因分析方法的精度不同而異。例如，一般而言，分子吸收分光光度法要求其相對(duì)差值小于5%，而原子吸收分光光度法則要求其相對(duì)差值小于10%等等。
校準(zhǔn)曲線(xiàn)的控制
被測(cè)物轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩芤旱姆磻?yīng)稱(chēng)為顯色反應(yīng)或發(fā)色反應(yīng)。顯色反應(yīng)的介質(zhì)PH條件、顯色劑用量、顯色反應(yīng)的時(shí)間和溫度、為消除共存物干擾而加入的掩蔽劑、甚至加試劑的順序，都要按照方法步驟的要求執(zhí)行。有時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)系列雖然不像實(shí)際試樣那樣組成復(fù)雜，但仍要求與試樣進(jìn)行同樣的處理步驟，以便控制校準(zhǔn)曲線(xiàn)上的數(shù)據(jù)點(diǎn)的空白、回收率等因素。
建立校準(zhǔn)曲線(xiàn)時(shí)，測(cè)量吸光度的參比有兩種選擇。
第一種方法用純?nèi)軇┳鲄⒈�，兩個(gè)比色皿都放溶劑時(shí)，“樣品比色皿”的吸光度測(cè)定值為比色皿成對(duì)性校正值，此后所有樣品吸光度測(cè)定值都須扣除此值，進(jìn)行校正。然后，以純?nèi)軇閰⒈龋瑴y(cè)定空白及標(biāo)準(zhǔn)系列的吸光度，繪制校準(zhǔn)曲線(xiàn)。
第二種方法直接用空白為參比。當(dāng)兩個(gè)比色皿都放空白時(shí)，測(cè)定比色皿成對(duì)性校正值，然后測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列的吸光度，繪制校準(zhǔn)曲線(xiàn)。兩種方法得到的兩條校準(zhǔn)曲線(xiàn)互相平行，但第一種方法可測(cè)定空白的水平，后一種方法不能測(cè)定空白，理論上校準(zhǔn)曲線(xiàn)通過(guò)原點(diǎn)。若空白為零，兩條校準(zhǔn)曲線(xiàn)重合。無(wú)論用什么作參比，實(shí)樣測(cè)定時(shí)應(yīng)該使用與建立校準(zhǔn)曲線(xiàn)相同的比色皿和同樣的參比。
比色皿的成對(duì)性校正對(duì)于使用已久的比色皿是必要的，尤其是測(cè)量吸光度很小的樣品時(shí)，校正可保證測(cè)量值的可靠性和重復(fù)性。
分析空白
分析空白的主要來(lái)源和控制措施
1.環(huán)境對(duì)樣品的玷污
主要是由空氣中的污染氣體和沉降微粒引起的。普遍實(shí)驗(yàn)室中每立方米空氣中含有數(shù)百微克的微粒。這些微粒含有多種元素，因而可引起多種和痕量元素的玷污。來(lái)自環(huán)境的玷污不但顯著，而且變動(dòng)性大。應(yīng)采取局部或整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的防塵與空氣凈化措施。
2.試劑對(duì)樣品的玷污
試劑對(duì)樣品的玷污隨試劑用量而變化。對(duì)一定的試劑用量是恒定的。樣品處理過(guò)程中用量最多的是水和酸。
3.器皿對(duì)樣品玷污
貯存、處理樣品所用的一切器皿，如燒杯、瓶子、過(guò)濾器、研缽等，由于其材質(zhì)不夠純或者未洗滌干凈均可能玷污樣品。在痕量分析中應(yīng)選用高純惰性材料制成的器皿，并運(yùn)用合適的清洗技術(shù)。聚四氟乙烯、透明的合成石英的高壓聚乙烯是比較合適的器皿材料。
4.分析測(cè)試者對(duì)樣品的玷污
分析測(cè)試者用手觸摸樣品可引起多種元素的玷污；分析測(cè)試者的化妝品常常不知不覺(jué)地帶來(lái)許多元素的玷污；分析測(cè)試者使用的內(nèi)服和外用藥物也常常玷污樣品；以及分析測(cè)試者若不注意個(gè)人衛(wèi)生也會(huì)引起樣品的玷污。所以，分析測(cè)試者不但要具有正確熟練的操作技巧，而且要知道自身對(duì)樣品可能帶來(lái)什么玷污，以采取消除玷污的必要措施。
分析空白的監(jiān)測(cè)和空白值的扣除
空白值波動(dòng)較大，往往在百分之幾十，甚至百分之幾百的水平上波動(dòng)。因而痕量與超痕量分析中，扣除空白是比較困難的，也是不可靠的�？煽坎⑿兄行У姆椒ㄊ前逊治隹瞻捉抵量梢院雎圆挥浀某潭�，同時(shí)在分析過(guò)程中作空白的平行測(cè)定，以監(jiān)視分析過(guò)程。若分析空白明顯的超過(guò)正常值，則表明本次分析測(cè)定過(guò)程有嚴(yán)重的玷污，平行樣品的測(cè)定結(jié)果不可靠。
在分析空白主要來(lái)自試劑的玷污時(shí)，空白值比較穩(wěn)定，若有必要，可以扣除空白值。為獲得可靠的空白值，應(yīng)進(jìn)行多次重復(fù)測(cè)定，算出空白值及其置信限：B ±t0.95(SB/n2)。
文章來(lái)源：網(wǎng)絡(luò)
最佳測(cè)定范圍
最佳測(cè)定范圍（又稱(chēng)有效測(cè)定范圍）
指在限定誤差范圍滿(mǎn)足預(yù)定要求的前提下，特定方法的測(cè)定下限至測(cè)定上限之間的濃度范圍。在此范圍內(nèi)能夠準(zhǔn)確地測(cè)定待測(cè)物質(zhì)的濃度或量。
最佳測(cè)定范圍應(yīng)小于方法的適應(yīng)范圍。對(duì)測(cè)量結(jié)果的精密度（通常以相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示）要求越高，相應(yīng)的最佳測(cè)定范圍越小。
方法的線(xiàn)性范圍
方法的線(xiàn)性范圍是指信號(hào)與樣品濃度呈線(xiàn)性的工作曲線(xiàn)直線(xiàn)部分。通常把相當(dāng)于10倍空白的標(biāo)準(zhǔn)偏差相應(yīng)的濃度定為方法的線(xiàn)性范圍的定量檢測(cè)下限。取工作曲線(xiàn)中高濃度時(shí)，彎曲處作為方法的線(xiàn)性范圍的定量檢測(cè)上限。
好的分析方法要有寬的線(xiàn)性范圍。有的分析方法線(xiàn)性范圍只有一個(gè)數(shù)量級(jí)，有的分析方法線(xiàn)性范圍可達(dá)5~6個(gè)數(shù)量級(jí)。同一分析方法可用常亮、微量、痕量的物質(zhì)分析。
校準(zhǔn)曲線(xiàn)
校準(zhǔn)曲線(xiàn)包括標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和工作曲線(xiàn)，前者用標(biāo)準(zhǔn)溶液系列直接測(cè)量，沒(méi)有經(jīng)過(guò)預(yù)處理過(guò)程，這對(duì)于樣品往往造成較大誤差；而后者所使用的標(biāo)準(zhǔn)溶液經(jīng)過(guò)了與樣品相同的消解、凈化、測(cè)量等全過(guò)程。
凡應(yīng)用校準(zhǔn)曲線(xiàn)的分析方法，都是在樣品測(cè)得信號(hào)值后，從校準(zhǔn)曲線(xiàn)上查得其含量（或濃度）。因此，繪制準(zhǔn)確的校準(zhǔn)曲線(xiàn)，直接影響到樣品分析結(jié)果的準(zhǔn)確與否。此外，校準(zhǔn)曲線(xiàn)也確定了方法的測(cè)定范圍。
校準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制
同一系列被測(cè)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照標(biāo)準(zhǔn)方法規(guī)定的步驟，將被測(cè)物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩芤�。制備好的�?biāo)準(zhǔn)系列和空白，在方法選定的波長(zhǎng)下，測(cè)定吸光度。已被測(cè)物質(zhì)濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
對(duì)標(biāo)準(zhǔn)系列，溶液以純?nèi)軇閰⒈冗M(jìn)行測(cè)量后，應(yīng)先做空白校正，然后繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
標(biāo)準(zhǔn)溶液一般可直接測(cè)定，但如式樣的預(yù)處理較復(fù)雜致使污染或損失不可忽略時(shí)，應(yīng)和試樣同樣處理后再測(cè)定，
校準(zhǔn)曲線(xiàn)的斜率常隨環(huán)境溫度、試劑批號(hào)和貯存時(shí)間等實(shí)驗(yàn)條件的改變而變動(dòng)。
因此，在測(cè)定試樣的同時(shí)，繪制校準(zhǔn)曲線(xiàn)最為理想，否則應(yīng)在測(cè)定試樣的同時(shí)，平行測(cè)定零濃度和中等濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液各兩份，取均值相減后與原校準(zhǔn)曲線(xiàn)上的相應(yīng)點(diǎn)核對(duì)，其相對(duì)差值根據(jù)方法精密度不得大于5%～10%，否則應(yīng)重新繪制校準(zhǔn)曲線(xiàn)。
校準(zhǔn)曲線(xiàn)的檢驗(yàn)
1）線(xiàn)性檢驗(yàn)：即檢驗(yàn)校準(zhǔn)曲線(xiàn)的精密度。對(duì)于以4～6個(gè)濃度單位所獲得的測(cè)量信號(hào)值繪制的校準(zhǔn)曲線(xiàn)，分光光度法一般要求其相關(guān)系數(shù) | r | ≥0.9990，否則應(yīng)找出原因并加以糾正，重新繪制合格的校準(zhǔn)曲線(xiàn)。
2）截距檢驗(yàn)：即檢驗(yàn)校準(zhǔn)曲線(xiàn)的準(zhǔn)確度，在線(xiàn)性檢驗(yàn)合格的基礎(chǔ)上，對(duì)其進(jìn)行線(xiàn)性回歸，得出回歸方程y=a+bx ，然后將所得截距a與0作t檢驗(yàn)，當(dāng)取95%置信水平，經(jīng)檢驗(yàn)無(wú)顯著性差異時(shí)，a可做0處理，方程簡(jiǎn)化為y=bx，移項(xiàng)得x=y/b。在線(xiàn)性范圍內(nèi)，可代替查閱校準(zhǔn)曲線(xiàn)，直接將樣品測(cè)量信號(hào)值經(jīng)空白校正后，計(jì)算出試樣濃度。
當(dāng)a與0有顯著性差異時(shí)，表示校準(zhǔn)曲線(xiàn)的回歸方程計(jì)算結(jié)果準(zhǔn)確度不高，應(yīng)找出原因予以校正后，重新繪制校準(zhǔn)曲線(xiàn)并經(jīng)線(xiàn)性檢驗(yàn)合格。在計(jì)算回歸方程，經(jīng)截距檢驗(yàn)合格后投入使用。
回歸方程如不經(jīng)上述檢驗(yàn)和處理，就直接投入使用，必將給測(cè)定結(jié)果引入差值相當(dāng)于解決a的系統(tǒng)誤差。
3）斜率檢驗(yàn)：即檢驗(yàn)分析方法的靈敏度，方法靈敏度是隨實(shí)驗(yàn)條件的變化而改變的。在完全相同的分析條件下，僅由于操作中的隨機(jī)誤差導(dǎo)致的斜率變化不應(yīng)超出一定的允許范圍，此范圍因分析方法的精度不同而異。例如，一般而言，分子吸收分光光度法要求其相對(duì)差值小于5%，而原子吸收分光光度法則要求其相對(duì)差值小于10%等等。
校準(zhǔn)曲線(xiàn)的控制
被測(cè)物轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩芤旱姆磻?yīng)稱(chēng)為顯色反應(yīng)或發(fā)色反應(yīng)。顯色反應(yīng)的介質(zhì)PH條件、顯色劑用量、顯色反應(yīng)的時(shí)間和溫度、為消除共存物干擾而加入的掩蔽劑、甚至加試劑的順序，都要按照方法步驟的要求執(zhí)行。有時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)系列雖然不像實(shí)際試樣那樣組成復(fù)雜，但仍要求與試樣進(jìn)行同樣的處理步驟，以便控制校準(zhǔn)曲線(xiàn)上的數(shù)據(jù)點(diǎn)的空白、回收率等因素。
建立校準(zhǔn)曲線(xiàn)時(shí)，測(cè)量吸光度的參比有兩種選擇。
第一種方法用純?nèi)軇┳鲄⒈�，兩個(gè)比色皿都放溶劑時(shí)，“樣品比色皿”的吸光度測(cè)定值為比色皿成對(duì)性校正值，此后所有樣品吸光度測(cè)定值都須扣除此值，進(jìn)行校正。然后，以純?nèi)軇閰⒈龋瑴y(cè)定空白及標(biāo)準(zhǔn)系列的吸光度，繪制校準(zhǔn)曲線(xiàn)。
第二種方法直接用空白為參比。當(dāng)兩個(gè)比色皿都放空白時(shí)，測(cè)定比色皿成對(duì)性校正值，然后測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列的吸光度，繪制校準(zhǔn)曲線(xiàn)。兩種方法得到的兩條校準(zhǔn)曲線(xiàn)互相平行，但第一種方法可測(cè)定空白的水平，后一種方法不能測(cè)定空白，理論上校準(zhǔn)曲線(xiàn)通過(guò)原點(diǎn)。若空白為零，兩條校準(zhǔn)曲線(xiàn)重合。無(wú)論用什么作參比，實(shí)樣測(cè)定時(shí)應(yīng)該使用與建立校準(zhǔn)曲線(xiàn)相同的比色皿和同樣的參比。
比色皿的成對(duì)性校正對(duì)于使用已久的比色皿是必要的，尤其是測(cè)量吸光度很小的樣品時(shí)，校正可保證測(cè)量值的可靠性和重復(fù)性。
分析空白
分析空白的主要來(lái)源和控制措施
1.環(huán)境對(duì)樣品的玷污
主要是由空氣中的污染氣體和沉降微粒引起的。普遍實(shí)驗(yàn)室中每立方米空氣中含有數(shù)百微克的微粒。這些微粒含有多種元素，因而可引起多種和痕量元素的玷污。來(lái)自環(huán)境的玷污不但顯著，而且變動(dòng)性大。應(yīng)采取局部或整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的防塵與空氣凈化措施。
2.試劑對(duì)樣品的玷污
試劑對(duì)樣品的玷污隨試劑用量而變化。對(duì)一定的試劑用量是恒定的。樣品處理過(guò)程中用量最多的是水和酸。
3.器皿對(duì)樣品玷污
貯存、處理樣品所用的一切器皿，如燒杯、瓶子、過(guò)濾器、研缽等，由于其材質(zhì)不夠純或者未洗滌干凈均可能玷污樣品。在痕量分析中應(yīng)選用高純惰性材料制成的器皿，并運(yùn)用合適的清洗技術(shù)。聚四氟乙烯、透明的合成石英的高壓聚乙烯是比較合適的器皿材料。
4.分析測(cè)試者對(duì)樣品的玷污
分析測(cè)試者用手觸摸樣品可引起多種元素的玷污；分析測(cè)試者的化妝品常常不知不覺(jué)地帶來(lái)許多元素的玷污；分析測(cè)試者使用的內(nèi)服和外用藥物也常常玷污樣品；以及分析測(cè)試者若不注意個(gè)人衛(wèi)生也會(huì)引起樣品的玷污。所以，分析測(cè)試者不但要具有正確熟練的操作技巧，而且要知道自身對(duì)樣品可能帶來(lái)什么玷污，以采取消除玷污的必要措施。
分析空白的監(jiān)測(cè)和空白值的扣除
空白值波動(dòng)較大，往往在百分之幾十，甚至百分之幾百的水平上波動(dòng)。因而痕量與超痕量分析中，扣除空白是比較困難的，也是不可靠的�？煽坎⑿兄行У姆椒ㄊ前逊治隹瞻捉抵量梢院雎圆挥浀某潭�，同時(shí)在分析過(guò)程中作空白的平行測(cè)定，以監(jiān)視分析過(guò)程。若分析空白明顯的超過(guò)正常值，則表明本次分析測(cè)定過(guò)程有嚴(yán)重的玷污，平行樣品的測(cè)定結(jié)果不可靠。
在分析空白主要來(lái)自試劑的玷污時(shí)，空白值比較穩(wěn)定，若有必要，可以扣除空白值。為獲得可靠的空白值，應(yīng)進(jìn)行多次重復(fù)測(cè)定，算出空白值及其置信限：B ±t0.95(SB/n2)。
文章來(lái)源：網(wǎng)絡(luò)
