但胚胎移植技術(shù)科技含量高，投資成本大，使該技術(shù)在國(guó)內(nèi)畜牧良種繁育方面應(yīng)用力度不大，移植妊娠率相對(duì)不高，制約了畜牧良種繁育推廣和畜牧業(yè)快速發(fā)展。

 

　　陜西省布爾羊良種繁育中心從1998年開(kāi)始，連續(xù)引進(jìn)泰國(guó)、澳大利亞、南非等國(guó)外胚胎生物工程專(zhuān)家，與西農(nóng)大專(zhuān)家合作開(kāi)展山羊胚胎移植上千例，取得了很好的成果。從供體和受體的選擇，供體的超排，受體同期化發(fā)情處理，胚胎回收、沖洗、鑒定，受體移植，受體羊的飼養(yǎng)等方面做了深入研究，總結(jié)出提高山羊胚胎移植成功率的主要因素。

 

選擇優(yōu)秀的供體和受體

 

　　供體 選擇表現(xiàn)型好、生產(chǎn)水平高、遺傳性穩(wěn)定、體質(zhì)健康、發(fā)情周期正常、無(wú)生殖道疾病、有1胎~2胎正常繁殖史的2歲~5歲青壯年羊做供體。

 

　　受體 要求體形大、無(wú)生殖道疾病、產(chǎn)奶量高、哺乳力強(qiáng)的空懷母羊?yàn)槭荏w，受體羊年齡2歲~5歲且有1胎~2胎正常繁殖史。供體和受體羊的比例一般為1∶10~1∶12為宜。

 

加強(qiáng)供體和受體羊的飼養(yǎng)管理

 

　　供體和受體羊在手術(shù)前3個(gè)月~4個(gè)月必須全部選留到位，并做好疫病的預(yù)防接種及必要的疫病監(jiān)測(cè)及驅(qū)蟲(chóng)等工作。從術(shù)前2個(gè)月加強(qiáng)飼養(yǎng)，將日糧中的蛋白質(zhì)逐漸提高到20%~30%，要求羊身體健康，中上等膘情，防止過(guò)肥或過(guò)瘦。供體羊特別在處理期間及受體羊胚移后不能突然改變飼養(yǎng)環(huán)境、飼養(yǎng)方式及飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，避免長(zhǎng)途運(yùn)輸、意外驚嚇等應(yīng)激影響導(dǎo)致羊不排卵、胚胎退化及死亡，影響移植受胎率。

 

選擇適宜的胚胎移植季節(jié)

 

　　山羊胚胎移植最佳適宜的季節(jié)為8月~10月。7月羊處于發(fā)情初期，出現(xiàn)發(fā)情不排卵的比率較高，11月移植所產(chǎn)生的羔羊在次年4月其成活率及生長(zhǎng)速度較低。應(yīng)避開(kāi)最熱和最冷的季節(jié)，氣溫高于32℃，移植成功率較低。另外，陰雨天對(duì)移植成功率也有一定影響，應(yīng)盡量避開(kāi)。

 

使用最佳藥品，準(zhǔn)確把握劑量

 

　　胚胎移植技術(shù)在國(guó)內(nèi)運(yùn)用規(guī)模尚小，沒(méi)有專(zhuān)門(mén)生產(chǎn)胚胎移植藥品的廠家，目前國(guó)內(nèi)使用的胚胎移植藥品大部分都是科研單位自己研制，沒(méi)有大量應(yīng)用臨床實(shí)踐。選擇進(jìn)口藥物釋放性能好，效價(jià)穩(wěn)定，筆者在胚胎移植過(guò)程中，多年使用進(jìn)口硅膠陰道栓，其操作方法簡(jiǎn)單，處理效果好，受到國(guó)內(nèi)專(zhuān)家好評(píng)。筆者總結(jié)出胚胎移植采用21天藥物處理程序，在第9天換栓1次，注射加拿大生產(chǎn)的FSH（Foltropin-r），劑量為200毫克~300毫克為宜，臂部肌肉分4天8次遞減注射，PMSG劑量以200IU為宜，受體同期發(fā)情利用率可達(dá)87.7%，撤栓時(shí)間受體應(yīng)比供體早撤栓12小時(shí)。供體羊注射PMSG劑量大則產(chǎn)生的未受精卵多，發(fā)情持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)。

 

做好供體羊配種及受體羊試情記錄

 

　　發(fā)情測(cè)定以供受體羊開(kāi)始接受爬跨時(shí)間到拒絕接受爬跨時(shí)間為準(zhǔn)，以6小時(shí)~8小時(shí)進(jìn)行1次測(cè)情，一般用結(jié)扎輸精管后3個(gè)月的試情公羊測(cè)情，供體配種采用人工授精與公羊本交相結(jié)合的方式進(jìn)行，間隔6小時(shí)配種1次，胚胎有效利用率為99.8%，從發(fā)情開(kāi)始至發(fā)束為止，一定要做好詳細(xì)的登記。

 

抓好胚胎移植術(shù)前的消毒工作

 

　　手術(shù)前對(duì)手術(shù)器械進(jìn)行高壓（15磅壓力30分鐘）、干熱（每小時(shí)220℃）滅菌，場(chǎng)地用紫外線照射30分鐘，噴灑消毒劑進(jìn)行手術(shù)場(chǎng)地及環(huán)境消毒，手術(shù)過(guò)程做到無(wú)菌操作。手術(shù)前受體禁食24小時(shí)，限量飲水，以防止手術(shù)前腹壓過(guò)大，造成手術(shù)困難和羊生殖道的損傷。

 

選擇正確的沖胚方法

 

　　供體采胚多采用手術(shù)沖胚法進(jìn)行，子宮角采集胚胎應(yīng)于配種后6天~6天半進(jìn)行，輸卵管沖胚法在配種后2天~3天進(jìn)行；麻醉以國(guó)產(chǎn)藥品846合劑肌肉注射進(jìn)行全身麻醉，同時(shí)準(zhǔn)備國(guó)產(chǎn)速醒靈解麻藥品進(jìn)行解救以防意外；手術(shù)部位利用電動(dòng)剪進(jìn)行剪毛，5%的碘酊消毒，切口應(yīng)在乳房前腹中線兩側(cè)2厘米~3厘米處手術(shù)切口，以提高羊可手術(shù)次數(shù)，創(chuàng)口以3厘米~4厘米為宜；當(dāng)摸到子宮角或卵巢后不要強(qiáng)抓，用食指和中指輕輕夾住子宮角或輸卵管，緩慢牽引出切口外，不可用力過(guò)大或觸壓卵巢；進(jìn)行子宮角沖胚，沖胚液以20毫升~30毫升為宜，沖胚管（進(jìn)口）氣囊注入空氣為3毫升~4毫升；沖洗干凈手術(shù)部位的血凝塊，向腹腔內(nèi)注入含青鏈霉素的溫?zé)嵘�理鹽水250毫升~500毫升，將子宮角或輸卵管完全還納腹腔后，檢查腹腔有無(wú)異物，然后進(jìn)行腹膜縫合，依次為肌肉、皮膚縫合，皮膚涂紅霉素軟膏。

胚胎質(zhì)量鑒定

 

　　將沖出的胚胎倒入檢卵皿內(nèi)，在顯微鏡下進(jìn)行檢查，評(píng)定等級(jí)，按其質(zhì)量分為A、B、C三級(jí)，將C級(jí)胚胎及未受精卵、死胚、變性胚胎等不可用胚胎棄掉。一般根據(jù)受體羊黃體發(fā)育程度進(jìn)行1枚~3枚移植。盡量將兩枚胚胎同時(shí)移植入有黃體的同側(cè)子宮角內(nèi)。據(jù)測(cè)定，其胚胎成活率為70.5%，明顯高于移植1枚的成活率（62%）。

 

胚胎質(zhì)量與移植方法

 

　　將胚齡為6天~6天半胚胎移入同步發(fā)情±12小時(shí)(9.74±2.85)的受體子宮角內(nèi)，此時(shí)大多為早期囊胚或囊胚，其受胎率及產(chǎn)羔率也較高，桑椹胚受胎率52.6%(81/51)，產(chǎn)羔率85.6%(101/118)；早期囊胚受胎率59.4%(19/32)；產(chǎn)羔率88.5%(23/26)；擴(kuò)張囊胚的受胎率66.2%（43/65)，產(chǎn)羔率78.3%(65/83)；囊胚受胎率57.7%(45/78)，產(chǎn)羔率98.5%(58/59)；孵化胚受胎率52.2%(24/26)，產(chǎn)羔率81.8%(27/33)。由此可見(jiàn)，胚胎質(zhì)量的好壞，對(duì)受胎率影響很大。采用腹腔鏡進(jìn)行移植，其特點(diǎn)是創(chuàng)口小，移植速度快，術(shù)后感染率低，一般手術(shù)熟練者移植1只需1分半鐘~3分鐘，每天可移植120只~150只，鮮胚妊娠率為60%~80%，術(shù)后感染率為5%以下，可以有效地節(jié)約時(shí)間，提高受胎率。

 

飼養(yǎng)管理與妊娠診斷

 

　　由于移植后的受體羊身價(jià)倍增，應(yīng)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，給予營(yíng)養(yǎng)豐富的飼草飼料，避免因驚嚇、急趕、突然改變飼養(yǎng)環(huán)境、喂冰凍飼料及飲水等引起的應(yīng)激反應(yīng)造成胚胎早期死亡和胚移羊中后期流產(chǎn)，應(yīng)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理；利用B超儀器進(jìn)行早期診斷，對(duì)懷孕胚胎移植羊按移植時(shí)間、批次以35只為單位組群，安排責(zé)任心強(qiáng)的人員管護(hù)飼養(yǎng)，每天檢查1次~2次傷口，發(fā)現(xiàn)傷口感染盡早處理。移植后兩個(gè)情期再進(jìn)行妊娠診斷：一般以2個(gè)情期未返情或用試情羊放入測(cè)情進(jìn)行鑒定，借助超聲波掃描儀進(jìn)行確診，及時(shí)處理空懷羊，給懷孕羊補(bǔ)充胡蘿卜等富含維生素A、D、E的飼草飼料，飼喂全價(jià)飼料，補(bǔ)充鈣、磷、鐵、硒等礦物質(zhì)微量元素。

 

　　綜上所述，胚胎移植技術(shù)環(huán)節(jié)多，程序復(fù)雜，關(guān)鍵技術(shù)要求嚴(yán)格，抓好每個(gè)環(huán)節(jié)都很重要，要想取得良好的移植效果，應(yīng)具備技術(shù)過(guò)硬的專(zhuān)業(yè)隊(duì)伍和責(zé)任心強(qiáng)的管理人員，才能使胚胎移植成功率達(dá)到更高的水平。