一、親魚(yú)選擇與培育
親魚(yú)可人工繁殖的或捕自自然海區(qū)。雌魚(yú)選擇體重0.5公斤~1公斤、腹部膨大而柔軟者;雄魚(yú)選擇體重1.5公斤以上、清壓腹部能流出精液者。雌雄親魚(yú)按1∶1~1∶3的比例搭配。石斑魚(yú)是雌性先熟的雌雄同體魚(yú)體,其6齡才轉(zhuǎn)化為雄魚(yú),近年來(lái),由于過(guò)度捕撈,自然海區(qū)的生殖群體中存在雌多雄少的性比失調(diào)現(xiàn)象,而且養(yǎng)殖條件下培育高齡大個(gè)體雄性親魚(yú)的時(shí)間長(zhǎng)且費(fèi)用也高,所以,親魚(yú)選擇中的難題是性腺成熟的雄魚(yú)不易獲得。為了解決人工繁殖中的雄性親魚(yú)不足,可用外源性激素17α-甲基睪酮誘導(dǎo)雌雄同體的赤點(diǎn)石斑魚(yú),可提早3齡~4齡使雌魚(yú)轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩彻δ艿男坌杂H魚(yú),而且17α-甲基睪酮不僅可以抑制卵黃生成,而且還可影響卵原細(xì)胞增殖和分化。對(duì)2齡~4齡魚(yú)投喂50天藥餌,每次劑量約5毫克/千克體重(累積量241.3毫克/千克體重),可使性轉(zhuǎn)變的雄性親魚(yú)流精率達(dá)93.5%,授精率達(dá)81.1%,胚胎發(fā)育正常。為解決雄性激素藥餌投喂法因攝餌量不均造成的“性轉(zhuǎn)變”效果不穩(wěn)定和每天投飼費(fèi)工、費(fèi)時(shí)等問(wèn)題,也可采用將17α-甲基睪酮植入魚(yú)體的雄性激素埋植法來(lái)誘導(dǎo)石斑魚(yú)提早“性轉(zhuǎn)變”。17α-甲基睪酮可一次性埋植到3齡~7齡成熟的赤點(diǎn)石斑魚(yú)雌魚(yú)內(nèi),50天~90天后雌魚(yú)就轉(zhuǎn)變?yōu)樾埕~(yú)魚(yú)體,使石斑魚(yú)“性轉(zhuǎn)變”過(guò)程提早5年~6年。用它們的精液得到的受精卵的受精率達(dá)73%、孵化率97%,仔魚(yú)發(fā)育正常,能達(dá)到人工繁殖的目的。在相同的處理?xiàng)l件下雌性高齡魚(yú)的“性轉(zhuǎn)變”時(shí)間比低齡魚(yú)短,且較易獲得釋精的變性雄魚(yú)。因此,在人工繁殖中應(yīng)盡量選擇較高齡的、個(gè)體較大的雌魚(yú)作變性處理,效果較好。
為了解決人工繁殖中性成熟的雄魚(yú)比較難得的問(wèn)題,還可應(yīng)用超低溫冷凍法保存精液,在液氮罐中冷凍保存2個(gè)月后的精液仍具有相當(dāng)于鮮精的活力,不影響人工繁殖的效果。人工繁殖的效果很大程度上取決于親魚(yú)性腺的成熟度,所以在誘導(dǎo)產(chǎn)卵前,加強(qiáng)親魚(yú)的培育,促其性腺發(fā)育至關(guān)重要。在室內(nèi)水泥池中蓄養(yǎng)或暫養(yǎng)石斑魚(yú)親魚(yú),通過(guò)人工強(qiáng)化培育,每日換水和吸污,親魚(yú)不用激素催產(chǎn)就能自然產(chǎn)卵受精,可獲得優(yōu)質(zhì)的受精卵。
二、催產(chǎn)
選擇好的雌性親魚(yú),用細(xì)塑膠管或挖卵器自產(chǎn)卵孔插入約3厘米~5厘米深吸出卵粒,置于載波片上,在顯微鏡下觀察其成熟程度,卵粒若易分離、蛋黃色、飽滿、卵徑0.3毫米~0.5毫米、加透明固定液后核已偏向動(dòng)物極,則成熟度較好。雄性親魚(yú)輕輕壓腹部有少許精液流出者成熟良好。石斑魚(yú)精液量少,檢查雄魚(yú)成熟度時(shí)切勿擠壓太重。催產(chǎn)劑有鯉魚(yú)腦垂體、絨毛膜促性腺激素、促黃體激素釋放激素類似物和LRH-A+PG的混合物等4種。
雌魚(yú)用PG10毫克/千克體重~12毫克/千克體重或LRH-A60微克/千克。以上劑量一般分兩次胸腔注射,第一次注射量占總量的2/3,兩次間的間隔時(shí)間在水溫25℃~26℃度時(shí)為24小時(shí)左右。雄性親魚(yú)注射劑量是雌魚(yú)的一半,均在雌魚(yú)第二次注射的同時(shí)進(jìn)行。注射用水為0.6%氯化鈉溶液,將催產(chǎn)劑溶解或制成懸濁液,注射液量為每尾親魚(yú)一次注射1毫升~2毫升為度。
三、人工授精和自然產(chǎn)卵受精
赤點(diǎn)石斑魚(yú)人工授精宜采用干法授精法。親魚(yú)注射第二針催產(chǎn)劑后10小時(shí)~13小時(shí)即 可產(chǎn)卵,由上而下輕壓雌魚(yú)腹部,將成熟魚(yú)卵擠入消毒過(guò)的白瓷碗中,反復(fù)5次~6次后即可 將親魚(yú)輕輕放回親魚(yú)蓄養(yǎng)池中。隨即再用同樣方法將雄魚(yú)精液擠入白瓷碗的卵堆上。石斑魚(yú)精液很少,連擠5次~6次總計(jì)也不過(guò)1毫升~2毫升,但已足夠用了。待最后一次擠精完成后 ,即用消毒海水浸濕過(guò)的潔凈羽毛將碗中卵和精液攪拌均勻,約1分鐘~2分鐘后加入少量消毒海水,繼續(xù)攪拌5分鐘后傾倒在消毒過(guò)的小臉盆中,加消毒的海水輕輕攪勻,靜置片刻。 所有受精卵都漂浮在水的中上層,死卵或未受精卵沉淀于底部。用消毒過(guò)的海水洗凈受精卵,除去多余的精子,以避免多精受精,然后將受精卵移入孵化器中孵化。
人工授精時(shí),應(yīng)避免陽(yáng)光直射,以免殺死精子。由于石斑魚(yú)屬分批產(chǎn)卵魚(yú)類,有連續(xù)多次產(chǎn)卵的生殖特點(diǎn)。
如果為親魚(yú)創(chuàng)造在產(chǎn)卵池中自然產(chǎn)卵受精的環(huán)境條件,就可以避免因人工授精時(shí)經(jīng)常出現(xiàn)的卵子過(guò)熟或不夠成熟的弊端,也可以減少因捕撈和擠卵、擠精液造成的對(duì)親魚(yú)的傷害。所以,也可采用強(qiáng)化培育石斑魚(yú)親魚(yú)的方法,促進(jìn)親魚(yú)分泌激素,不用注射催產(chǎn)劑而能自然產(chǎn)卵受精,從而獲得了優(yōu)質(zhì)受精卵,提高了仔魚(yú)成活率,降低了畸形率。自然產(chǎn)卵方式優(yōu)于人工催產(chǎn)授精。產(chǎn)卵時(shí)適宜水溫25℃~27℃,海水鹽度32~35,pH7.8~8.5,產(chǎn)卵池面積 20平方米,水深約1.5米,池上方用遮光幕遮光,水流量40升/分鐘~50升/分鐘。
四、孵化
石斑魚(yú)產(chǎn)浮性卵,孵化應(yīng)在環(huán)道孵化器或孵化缸中進(jìn)行。孵化時(shí)魚(yú)卵密度為50粒卵/ 升海水~100粒卵/升海水,水流速度以能使魚(yú)卵或仔魚(yú)漂浮為度。孵化用水必須清新,需經(jīng)過(guò)沙濾和紫外光殺菌。水溫保持在25℃左右,鹽度30~33,并保持穩(wěn)定。孵化過(guò)程中需適度充氣,充氣量太大或太小都不好,使海水溶氧量保持在5毫克/升以上。孵化中盡量清除死卵 ,以防水質(zhì)變壞。赤點(diǎn)石斑魚(yú)和青石斑魚(yú)卵在以上條件下,自產(chǎn)卵受精后經(jīng)過(guò)24小時(shí)可以孵出魚(yú)。