1. 細(xì)胞庫(kù)之細(xì)胞培養(yǎng)基不加抗生素
1.1. 培養(yǎng)自ATCC 引進(jìn)之細(xì)胞株,培養(yǎng)基中不加抗生素。
1.2. 培養(yǎng)自其它實(shí)驗(yàn)室引進(jìn)之細(xì)胞株,制作token freeze 前培養(yǎng)基須添加抗生素,待token freeze 通過(guò)污染測(cè)試后,大量培養(yǎng)時(shí)則不加抗生素。
2. 寄送活細(xì)胞時(shí),須將培養(yǎng)液充滿整個(gè)flask 時(shí),則須添加抗生素(penicillin 100 units/ml streptomycin 100 ug/ml)。
3. 若要檢測(cè)mycoplasma,則培養(yǎng)基內(nèi)不可添加gentamicin,因gentamicin 會(huì)抑制
mycoplasma 生長(zhǎng)。
4. 去除細(xì)菌污染之抗生素混合配方: penicillin 250 units/ml, streptomycin 250 ug/ml, neomycin 250 ug/ml, bacitracin 2.5 units/ml,注意混合使用后藥物毒性會(huì)增強(qiáng)。
5. 抗生素使用種類與濃度:
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工作濃度 |
儲(chǔ)存溫度 |
殺滅細(xì)菌 |
penicillin |
100 units/ml |
-20℃ |
G( ) bacteria |
streptomycin |
100 ug/ml |
-20℃ |
G( ) and G(-) bacteria |
chlotetracycline |
50 ug/ml |
-20℃ |
G( ) and G(-) bacteria |
gentamicin |
50 ug/ml |
-20℃ |
G( ) and G(-) bacteria, mycoplasma |
amphotericin B |
2.5 ug/ml |
-20℃ |
yeast and molds |
nystatin |
50 ug/ml |
-20℃ |
yeast and molds |
fungizone |
2.5ug/ml |
-20℃ |
yeast and molds |