(一)天然染料
1、蘇木精 蘇木精是從南美的蘇木(熱帶豆科植物)干枝中用乙醚浸制出來的一種色素,是最常用的染料之一。蘇木精不能直接染色,必須暴露在通氣的地方,使他變成氧化蘇木精(又叫蘇木素)后才能使用,這叫做“成熟”。蘇木精的“成熟”過程需時較長,配置后時間愈久,染色力愈強。被染材料必須經(jīng)金屬鹽作媒劑作用后才有著色力。所以在配制蘇木精染劑時都要用媒染劑。常用的媒染劑有硫酸鋁按、鉀明礬和鐵明礬等。
蘇木精是淡黃色到銹紫色的結晶體,易溶于酒精,微溶于水和甘油,是染細胞核的優(yōu)良材料,他能把細胞中不同的結構分化出各種不同的顏色。分化時組織所染的顏色因處理的情況而異,用酸性溶液(如鹽酸—酒精)分化后呈紅色,水洗后仍恢復青藍色,用堿性溶液(如氨水)分化后呈藍色,水洗后呈藍黑色。
2、洋紅 洋紅又叫胭脂紅或卡紅。一種熱帶產(chǎn)的雌性胭脂蟲干燥后,磨成粉末,提取出蟲紅,再用明礬處理,除去其中雜質(zhì),就制成洋紅。單純的洋紅不能染色,要經(jīng)酸性或堿性溶液溶解后才能染色。常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸,堿性溶液有氨水、硼砂等。
洋紅使細胞核的優(yōu)良染料,染色的標本不易褪色。用作切片或組織塊染都適宜,尤其適宜于小型材料的整體染色。用洋紅配成的溶液染色后能保持幾年。洋紅溶液出現(xiàn)渾濁時要過濾后再用。
(二)人工染料
人工染料,即苯胺染料或煤焦油染料,種類很多,應用極廣。它的缺點是經(jīng)日光照射容易褪色,苯胺藍、亮綠、甲基綠等更易褪色。在制片中注意掌握酸堿度,并避免日光直射,也能經(jīng)幾年不褪色。
1、酸性品紅 酸性品紅是酸性染料,呈紅色粉末狀,能容于水,略溶于酒精(0.3%)。他是良好的細胞制染色劑,在動物制片上應用很廣,在植物制片上用來染皮層、髓部等薄壁細胞和纖維素壁。他跟甲基綠同染,能顯示線粒體。
組織切片在染色前先浸在帶酸性的水中,可增強它的染色力。酸性品紅容易跟堿起作用,所以染色過度,易在自來水中褪色。
2、剛果紅 剛果紅是酸性染料,呈棗紅色粉末狀,能溶于水喝酒精,遇酸呈藍色。他能作染料,也用作指示劑。他在植物制片中常作為蘇木精或其他細胞染料的襯墊劑。他用來染細胞質(zhì)時,能把膠制或纖維素染成紅色。在動物組織制片中用來染神經(jīng)軸、彈性纖維、胚胎材料等。剛果紅可以跟蘇木靜作二重染色,也可用作類淀粉染色,由于他能溶于水和酒精,所以洗滌和脫水處理要迅速。
3、甲基藍 甲基藍是弱酸性染料,能溶于水和酒精。甲基藍在動植物的制片技術方面應用極廣。他跟伊紅合用能染神經(jīng)細胞,也是細菌制片中不可缺少的染料。它的水溶液是原生動物的活體染色劑。甲基藍極易氧化,因此用他染色后不能長久保存。
4、固綠 固綠是酸性染料,能溶于水(溶解度為4%)和酒精(溶解度為9%)。固綠是一種染含有漿質(zhì)的纖維素細胞組織的染色劑,在染細胞和植物組織上應用極廣。他和蘇木精、番紅并列為植物組織學上三中最常用的染料。
5、蘇丹Ⅲ 蘇丹Ⅲ是弱酸性染料,呈紅色粉末狀,易溶于脂肪和酒精(溶解度為0.15%)。蘇丹Ⅲ是脂肪染色劑。
6、伊紅 這類染料種類很多。常用的伊紅Y,是酸性染料,呈紅色帶藍的小結晶或棕色粉末狀,溶于水(15攝氏度是溶解度達44%)和酒精(溶于無水酒精的溶解度為2%)。伊紅在動物制片中廣泛應用,是很好的細胞質(zhì)染料,常用作蘇木精的襯染劑。
7、堿性品(復)紅 堿性品紅是堿性染料,呈暗紅色粉末或結晶狀,能溶于水(溶解度1%)和酒精(溶解度8%)。堿性品紅在生物學制片中用途很廣,可用來染色膠原纖維、彈性纖維、嗜復紅性顆粒和中樞神經(jīng)組織的核質(zhì)。在生物學制片中用來染維管束植物的木質(zhì)化壁,又作為原球藻、輪藻的整體染色。在細菌學制片中,長用來鑒別結核桿菌。在 爾根氏反應中用作組織化學試劑,已核查脫氧核糖核酸。
8、結晶紫 結晶紫是堿性染料,能溶于水(溶解度9%)和酒精(溶解度8.75%)。結晶紫在細胞學、組織學和細菌學等方面應用極廣,是一種優(yōu)良的染色劑。他是細胞核染色常用的,用來顯示染色體的中心體,并可染淀粉、纖維蛋白、神經(jīng)膠質(zhì)等。凡是用番紅和蘇木精或其他染料染細胞核不能成功時,用它能得到良好的結果。用番紅和結晶紫作染色體的二重染色,染色體染成紅色,紡錘絲染成紫色,所以也是一種顯示細胞分裂的優(yōu)良染色劑。用結晶紫染纖毛,效果也很好。用結晶紫染色的切片,缺點是不易長久保存。
9、龍膽紫 龍膽紫是混合的堿性染料,主要是結晶紫和甲基紫的混合物。在必要是,龍膽紫能跟結晶紫互相替用。醫(yī)藥上用的紫藥水,主要成分是甲基紫,需要時能代替龍膽紫和結晶紫。
10、中性紅 中性紅是弱堿性染料,呈紅色粉末狀,能溶于水(溶解度4%)和酒精(溶解度1.8%)。它的堿性溶液中呈現(xiàn)黃色,在強堿性溶液中呈藍色,而在弱酸性溶液中呈紅色,所以能用作指示劑。中性紅無毒,常做活體染色的染料,用來染原生動物和顯示動植物組織中活細胞的內(nèi)含物等。陳久的中性紅水溶液,用作顯示尼爾體的常用染料。
11、番紅 番紅是堿性染料,能溶于水和酒精。番紅是細胞學和動植物組織學生常用的染料,能染細胞核、染色體和植物蛋白質(zhì),示維管束植物木質(zhì)化、木栓化和角質(zhì)化的組織,還能染孢子囊。
12、亞甲藍或美藍 亞甲藍或美藍是堿性染料,呈藍色粉末狀,能溶于水(溶解度9.5%)和酒精(溶解度6%)。亞甲藍是動物學和細胞學染色上十分重要的細胞核染料,其優(yōu)點是染色不會過深。
13、甲基綠 甲基綠是堿性染料。它是綠色粉末狀,能溶于水(溶解度8%)和酒精(溶解度3%)。甲基綠是最有價值的細胞和染色劑,細胞學上常用來染染色質(zhì),跟酸性品紅一起可作植物木質(zhì)部的染色。