原理
B淋巴細(xì)胞有表面Fc受體,以雞紅細(xì)胞作為指示細(xì)胞與相應(yīng)的抗紅細(xì)胞抗體形成EA,B淋巴細(xì)胞可以通過Fc受體與EA形成花環(huán),以此計(jì)算B淋巴細(xì)胞的數(shù)目。Fc受體并非B細(xì)胞所特有,中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞及巨噬細(xì)胞表面均有這種受體,但這些細(xì)胞可以通過形態(tài)學(xué)加以區(qū)別。此方法簡(jiǎn)單,目前較常采用,以檢測(cè)B淋巴細(xì)胞的百分率。
材料與試劑
基本同EAC花環(huán)試驗(yàn),只是不需要補(bǔ)體。
操作方法
1.EA懸液的制備 取4%雞紅細(xì)胞懸液2ml加入試管中,再加等量的1︰4 000稀釋的溶血素,混勻,置37℃水浴中15min,以Hank’s液洗滌2次,再以2mlHank’s液懸浮,為EA懸液。
2.取淋巴細(xì)胞懸液0.2ml于試管中,加入等量的4%的EA懸液,混勻,室溫或20℃作用30min,1000r/min離心5min,吸棄過多的上清液,置4℃ 2h~4h。
3.固定,制片,染色同EAC花環(huán)形成試驗(yàn)。
4.結(jié)果判定 同EAC花環(huán)形成試驗(yàn)。