1、標(biāo)準(zhǔn)品

　　標(biāo)準(zhǔn)品是放射免疫分析法定量的依據(jù)，由于以標(biāo)準(zhǔn)品的量用來表示被涮物質(zhì)的量，故標(biāo)準(zhǔn)品與被測物質(zhì)應(yīng)當(dāng)化學(xué)結(jié)構(gòu)一致并具有相同免疫活性。標(biāo)準(zhǔn)品作為定量的基準(zhǔn)。應(yīng)要求高度純化。標(biāo)準(zhǔn)品除含量應(yīng)具有準(zhǔn)確性外，還應(yīng)具備穩(wěn)定性，即在合理的貯存條件下保持原來的特性。

　　按實(shí)驗(yàn)要求，將標(biāo)準(zhǔn)品用緩沖液配成含不同劑量的標(biāo)準(zhǔn)溶液，用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2、標(biāo)記物

　　標(biāo)記抗原應(yīng)具備：①比放射性高，以保證方法的靈敏度；②免疫活性好；③所用的核素的半衰期盡可能長，標(biāo)記一次可較長時(shí)間使用，這對來之不易的抗原尤其重要；④標(biāo)記簡便、易防護(hù)。

　　要準(zhǔn)確測量B與F的放射性，必須有足夠的放射性強(qiáng)度。所選用的標(biāo)記抗原的量，在使用125I時(shí)達(dá)5000～15000cpm。

3、抗體

　　應(yīng)選擇特異性高、親和力強(qiáng)及滴度好的抗體，用于放射免疫測定。

　　根據(jù)稀釋曲線，選擇適當(dāng)?shù)南♂尪�，一般以結(jié)合率為50%作為抗血清的稀釋度。

4、B與F分離劑

　　以2%加膜活性炭溶液為例，2%加膜活性炭溶液的配制：

　　活性炭2g（杭州木材廠生產(chǎn)，森工牌732型）

　　右旋糖酐T200.2g

　　加0.1mol/L PB 至100ml

　　電磁攪拌1h，然后置于變通冰箱冰箱待用。

5、緩沖液

　　放射免疫分析技術(shù)所用的緩沖液有多種，要通過實(shí)驗(yàn)選用抗體和抗原結(jié)合最高的緩沖液。

　　目前最常用的緩沖液有下列幾種：①磷酸鹽緩沖液；②醋酸鹽緩沖液；③巴比妥緩沖液；④Tris –HCl緩沖液；⑤硼酸緩沖淮。其中以磷酸鹽緩沖液應(yīng)用最多。

　　在緩沖液中，除必須有弱酸及弱酸的鹽成分外，還應(yīng)根據(jù)不同檢測項(xiàng)目加入下列物質(zhì)：①保護(hù)蛋白：常用的有牛血清白蛋白或白明膠，濃度為0.1%～0.2%，用以降低試管對抗原的非特異性吸附。②防腐劑：多采用0.1%疊氮鈉、0.01%柳硫汞、溶菌酶或抗菌素。③酶抑制劑：如測定心鈉素等肽類激素時(shí)，要加入適量的抑肽酶，用以抑制血漿內(nèi)源性水解酶對待測物的降解；又如測定cAMP、cGMP時(shí)，需加入EDTA·2Na，抑制磷酸二酯酶的活性。④阻斷劑：在測定甲狀腺激素或測定某些甾體激素時(shí)，必須加阻斷劑，使和蛋白質(zhì)相結(jié)合的激素，變?yōu)橛坞x型。常用的阻斷劑有8—苯胺—1—萘磺酸、柳硫汞、水楊酸鈉、三氯醋酸鈉等。⑤載體蛋白：采用二抗作B與F分離劑時(shí)，要向反應(yīng)液中加入適量與第一抗體同種動(dòng)物的正常血清。在測定不含有血漿蛋白的樣品時(shí)，用PEG沉淀劑分離B、F，必須加適量γ球蛋白或正常人混合血清。

　　在神經(jīng)肽的RIA時(shí)，常用PELH緩沖液，（按1000ml,pH7.6）：

　　0．1mol/l PB　　　　　　　　980.0ml

　　0.3mol/L EDTA·2Na　　　　　10.0ml

　　0.2%洗必泰溶液　　　　　　　10.0ml

　　溶菌酶　　　　　　　　　　　1.0g