在較早的哺乳動物RNAi實(shí)驗(yàn)中,siRNAs是通過化學(xué)方法合成的,就像合成引物一樣,是應(yīng)用起來最方便的一種方法,研究人員幾乎不需要做什么工作。但是RNA合成成本高,定制周期長,特別是有特殊需求的RNA序列。由于價(jià)格比其他方法高出很多,而且設(shè)計(jì)好的siRNAs中通常只有大約25%的siRNAs能高效抑制基因的表達(dá)(抑制效率>80%),一個(gè)基因通常合成3—5對siRNAs ,這使得化學(xué)合成siRNA的成本更高(就是6—10條siRNAs,一個(gè)基因就不少于1500USD)。如果需要重復(fù)設(shè)計(jì),在國內(nèi)還有時(shí)間上的困擾,F(xiàn)在,多個(gè)廠家推出了不同的試劑盒,一個(gè)試劑盒可以自行設(shè)計(jì)合成多個(gè)siRNAs,靈活性和可控性都明顯提高,不失為一種經(jīng)濟(jì)的選擇。一般的做法是用先用其他方法篩選出最有效的序列后再進(jìn)行化學(xué)合成。
適用:已經(jīng)找到最有效的siRNA,接下來需要大量siRNA進(jìn)行研究
不適用:篩選多個(gè)siRNA來進(jìn)行等長時(shí)間的研究