一、直接法
1.標(biāo)本經(jīng)固定后,PBS洗滌3×3分鐘。
2.加熒光素標(biāo)記的抗體,濕盒內(nèi)37℃孵育50分鐘。
3.PBS洗滌3×3分鐘。
4.0.1%伊文氏蘭復(fù)染。
5.PBS洗3次,蒸餾水洗2次,每次3分鐘,以除去NaCl結(jié)晶。
6.緩沖甘油封片,鏡檢。
二、間接法
1.標(biāo)本固定后,PBS洗滌3×3分鐘。
2.滴加一抗,37℃ 40分鐘或4℃過夜。
3.PBS洗滌3×3分鐘。
4.滴加熒光標(biāo)記二抗37℃ 40分鐘。
5.PBS洗滌3×3分鐘。
6.0.1%伊文氏蘭復(fù)染。
7.PBS洗滌3×3分鐘。
8.緩沖甘油封片,鏡檢。