將某一特定的靶基因傳遞到靶細胞，需要應(yīng)用某一基因運載系統(tǒng)，目前將這一系統(tǒng)概括為兩大類：非病毒辣方法和病毒方法。

1.基因轉(zhuǎn)移的非病毒方法

直接注射法 將含有DNA的溶液直接注射到肌肉，以引起鄰近的細胞攝入DNA燕進行表達，在肌細胞中，基因表達可持續(xù)數(shù)月。

磷酸鈣共沉淀法 將氯化鈣、DNA和磷酸鹽緩沖液混合，形成磷酸鈣微沉淀 ，附著于細胞膜并經(jīng)過細胞內(nèi)吞作用耐是入細胞質(zhì)。該方法的轉(zhuǎn)化效率通常很低。

脂質(zhì)體染法 指質(zhì)體能在體內(nèi)或體外提供運載外源性遺傳物質(zhì)進入細胞的載體。脂質(zhì)體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移的最大優(yōu)勢在于能在活體內(nèi)應(yīng)用。

受體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移 依靠受體介導(dǎo)的細胞內(nèi)吞途徑以轉(zhuǎn)移外源基因。受體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移方法是在質(zhì)粒DNA和某種特異的多肽（配體）之間形成復(fù)合體，而這種多肽能為細胞表面的肥體所識別。如若將DNA在體內(nèi)運送至肝內(nèi)，可以選將DNA和能與肝細胞受體特異結(jié)合的去唾液酸糖蛋白質(zhì)偶聯(lián)，以便通過細胞內(nèi)吞過程而被攝入，這種DNA大部分被肝臟所攝取。應(yīng)用該方法轉(zhuǎn)移的外源基因在活體內(nèi)的表達持續(xù)時間較短，在評估實際應(yīng)用前影上還在一些問題。
顯微注射法 在顯微鏡下，將DNA經(jīng)同細胞玻璃針地接注入細胞，該法適合于各種培養(yǎng)生長的細胞，但需要一定的設(shè)備和操作用支巧。

電穿孔法 利用脈沖場將DNA導(dǎo)入培養(yǎng)細胞。

微粒子轟擊法（基因槍）近幾年發(fā)展較快的轉(zhuǎn)移方法。使用高能微粒子轟擊將DNA導(dǎo)入培胞或活的哺乳動物組織內(nèi)。亞微粒的鎢和金能自發(fā)地吸附DNA，將這些微彈加強速到很的速度轟擊細胞。實驗結(jié)果表明，用這種方法靶基因可在皮膚、肌肉、肝、胰、胃和乳腺等細胞中表達。

胚胎干細胞法 胚胎干細胞是從受精卵開始分裂至4個國胞階段未分化和具有多種潛能的生殖細胞，能在體外培養(yǎng)，可作為正面細胞，制備轉(zhuǎn)基因動物，以研究基因定向整合或基因剔險及基因及能。

精子載體法 最近發(fā)現(xiàn)用精子和NDA-劑孵育，可捕獲得DNA。通過受精過程，將外源性基因?qū)�入受精卵，可捕獲得物物，大大間化了轉(zhuǎn)基因動物的制備過程。

2.基因轉(zhuǎn)移的病毒的方法

病毒作為基因轉(zhuǎn)移的是基因遞送有有并工具，病毒載體的優(yōu)點有：（1）在轉(zhuǎn)化的細胞中傳播重組的DNA分子作為穩(wěn)定的遺傳成分；（2）在可能將有有制陷的或突變的基因置于病毒調(diào)節(jié)信號的控制下以進行研究；（3）能將克隆的基因作為病毒微染色體的一部分 ，并能進分離；（4）轉(zhuǎn)移效率較高。其主要缺點是病毒載體對外源基因的最大容納量只有2500bp。目前常用的病毒載體有下列幾種。

逆轉(zhuǎn)錄病毒載體 逆轉(zhuǎn)錄病毒辣為RNA病毒，它們的基因組編碼在一條單鏈RNA他婦上，病毒進入細胞通過逆轉(zhuǎn)錄作用，病毒RNA即轉(zhuǎn)變?yōu)殡p鏈DNA分子，DNA進入細胞核并整合在細胞染色體中，這種整合的病毒稱為原病毒。在原病毒的兩端各有一長末端重復(fù)序列（LTR）,LTR內(nèi)側(cè)還有為復(fù)制所必需的其他順序，包括包裝信號。目前常用的逆轉(zhuǎn)病毒載體有CMV和SV。

DNA病毒載體 主要有腺病毒相關(guān)病毒載體，腺端正毒載體，皰疹病毒載體。對DNA病毒載體的研究是當(dāng)前基因基因治療研究中的重點領(lǐng)域。
常用的基因轉(zhuǎn)染技術(shù)

將外源基因?qū)�入靶細胞需要一定的載體和導(dǎo)入方法，基因轉(zhuǎn)技術(shù)則是將純化的含有靶基因的質(zhì)粒DNA送入細胞內(nèi)，并在細胞內(nèi)表達。轉(zhuǎn)染方法有多種，根據(jù)不同的細胞，貼壁或懸浮細所可選用不同的方法，其目的是要達到設(shè)置轉(zhuǎn)染效率，影響轉(zhuǎn)染產(chǎn)率的因素有多種，包括轉(zhuǎn)染方法、操作技術(shù)、質(zhì)粒DNA的純度、靶細胞的生長狀態(tài)等，下面重點介紹向幾種常用的轉(zhuǎn)染技術(shù)：

靶細胞的準(zhǔn)備 被用于作靶基因轉(zhuǎn)染的細胞，其生長狀態(tài)如何，將直接決定了基因轉(zhuǎn)染效率。如為貼壁生長的細胞，一般要求在轉(zhuǎn)染前一日，必需應(yīng)用胰酶處理成單細胞懸液，重新接種于培養(yǎng)皿或瓶，細胞密度以鋪滿培養(yǎng)器皿的60%為宜，轉(zhuǎn)染當(dāng)日，在轉(zhuǎn)染前4小時換一將近新鮮培養(yǎng)液。對于懸浮細胞，也需在轉(zhuǎn)染前4小時換一次新鮮培養(yǎng)液。

靶基因質(zhì)粒DNA的準(zhǔn)備 用于轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒DNA必須無蛋白質(zhì)，無RNA和其了化學(xué)物質(zhì)的污染，OD260/280比值應(yīng)在1.8以上。應(yīng)用酚-氯仿抽提法制備的質(zhì)粒DNA一般難以達到此標(biāo)準(zhǔn)，目前大多采用進口的術(shù)提取純化試劑盒。

具體的基因轉(zhuǎn)染技術(shù)有鱗酸鈣介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染法、DEAE葡聚糖介導(dǎo)轉(zhuǎn)染法、脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染法及電擊基因轉(zhuǎn)導(dǎo)塵等。靶基因被導(dǎo)入細胞后，一般在轉(zhuǎn)染后48小時，靶基因即在細胞內(nèi)表達。根據(jù)不同的實驗?zāi)康模?8小時后即可進行靶基因表達的檢測等實驗。如若建立穩(wěn)定的細胞系，則可對靶細胞進行篩選，根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標(biāo)志選用相應(yīng)的藥物，最常用的直核表達基因載體的標(biāo)志物有潮霉素（hygromycin）和新霉素（neomycin）。