又稱(chēng)彷徨試驗(yàn)、變量試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)證明抗噬菌體突變體的出現(xiàn)與接觸噬菌體無(wú)關(guān),而是基因突變的結(jié)果。此實(shí)驗(yàn)根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)原理設(shè)計(jì):取對(duì)噬菌體敏感的大腸桿菌懸液(103/毫升)分別裝入甲、乙兩只試管內(nèi),每管10毫升。甲管中的菌液再分裝50支小試管中,每管0.2毫升,保溫24~36小時(shí),及時(shí)把各小管的菌液分別倒在涂有噬菌體的平板上,經(jīng)培養(yǎng)后,對(duì)各平板上出現(xiàn)的抗噬菌體的菌落計(jì)數(shù);乙管中的菌液不分裝,先保溫24~36小時(shí)后才分成50份,加到同樣涂有噬菌體的平板上,培養(yǎng)后分別對(duì)各平板上出現(xiàn)的抗性菌落計(jì)數(shù)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),來(lái)自甲管的50個(gè)平板中,各平板間菌落數(shù)相差甚大;乙管的菌落數(shù)則基本相同。這表明大腸桿菌對(duì)噬菌體的抗性來(lái)自基因突變,這種突變發(fā)生在大腸桿菌接觸相應(yīng)的噬菌體之前,由細(xì)胞在分裂過(guò)程中自發(fā)地、隨機(jī)地產(chǎn)生。來(lái)自甲管的許多平板上不出現(xiàn)抗性菌落,是由于在接觸噬菌體前沒(méi)有發(fā)生過(guò)突變;在有的平板上可能出現(xiàn)幾百個(gè)菌落,那是由于突變發(fā)生得較早,同時(shí)也說(shuō)明某一性狀的突變與環(huán)境因素不相對(duì)應(yīng)。此試驗(yàn)亦用于證明抗藥性突變的出現(xiàn)與接觸藥物無(wú)關(guān)。