[ 目的 ] 為了檢驗(yàn)海參營養(yǎng)素是否具有抗疲勞作用,進(jìn)行了此項(xiàng)研究。
[ 方法 ] 首先進(jìn)行劑量分組,按推薦人體日攝入量( 2g/60kg 體重)的 30 倍、 20 倍、 10 倍設(shè)計(jì),分 3 個(gè)實(shí)驗(yàn)組及蒸餾水對照組。管飼法染毒。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室溫度( 25 ± 2 )℃,每日稱體重后灌胃 1 次,連續(xù) 30 天后分別測定以下各項(xiàng)抗疲勞作用指標(biāo)。小鼠負(fù)重游泳試驗(yàn):末次給予受試物 30mim 后,稱體重,鼠尾根部負(fù)責(zé) 5 %體重鉛皮,置于游泳箱中游泳。記錄自游泳開始至死亡時(shí)間( min );肝素原測定(蒽酮法):末次給予受試物 30min 后處死,取肝臟,稱取 200mg 。加入 4.0mlTCA ,每管勻漿 1min ,將勻漿液 30r/min 離心 15min ,把上清液移至另一試管內(nèi),在沉淀中再加入 4.0mlTCA ,勻漿 1min ,再離心 15min 。合并混勻兩次上清液。取 1.0ml 上清液放入 10ml 離心管中,每管中加入 95 %乙醇 4.0ml ,充分混勻,加塞,室溫下豎立放置過液,沉淀完全后, 3000r/min 離心 15min ,棄去上清液,使試管倒立 10min 。用 2.0ml 蒸餾水溶解肝糖原,將 10.0ml 蒽酮試劑用力加入各管,放入沸水浴 15min ,再移至冷水浴,冷卻至室溫,在波長 620nm 處比色,用空白管調(diào)零,計(jì)算肝糖原含量。血乳酸測定:末次給予受試物 30min 后,尾根部負(fù)重,置于游泳箱中游泳。第 60min 取出,靜止 15min ,摘眼球采血。于 5ml 試管中加入 0.481 % NaF 溶液,準(zhǔn)確吸取全血 20ul 加入試管底部,用試管上清液清洗微量吸管數(shù)次,再加入 1.5ml 蛋白沉淀劑,振蕩混勻。于 3000r/min 離心 10min ,取上清液 0.5ml 加入沉淀管,取乳酸標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液 0.5ml 加入標(biāo)準(zhǔn)管,取沉淀劑 -NaF 混合液 0.5ml 加入空白管,向各管中加入 0.1ml 4% CuSO 4 ,再加入 3.0ml 濃硫酸,充分混勻,置沸水浴加熱 5min ,取出放入冰水浴冷卻 10min ,向各管中加入 0.1ml 1.5% 對羥基聯(lián)苯搖勻,置( 30 ± 1 )℃水浴 30min ,再放入沸水浴加熱 90s ,取出冷卻至室溫,在波長 560nm 處用 5mm 光徑比色皿比色,空白管調(diào)零,計(jì)算血乳酸含量。血清尿素氮、血清乳酸脫氫酶、血糖測定,按試劑盒使用說明操作,用 COBAS MIRA 全自動(dòng)化分析儀測定。
[ 結(jié)果 ] 海參營養(yǎng)素能延長小鼠的游泳時(shí)間,增加小鼠肝糖原含量,減少小鼠血乳酸含量,對小鼠血清尿素氮、乳酸脫氫酶、血糖作用不明顯;對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體重增長無明顯影響。
[ 結(jié)論 ] 在本實(shí)驗(yàn)條件下,表明海參營養(yǎng)素可能具有一定的抗疲勞作用。