前置知識(shí)移液器是一種常用的實(shí)驗(yàn)室工具,用于精確地轉(zhuǎn)移液體。 它通常由一個(gè)管身和一個(gè)可調(diào)節(jié)容量的活塞組成。移液器可以用于測量和轉(zhuǎn)移各種體積的液體,從微升到毫升不等。 移液器的使用可以幫助實(shí)驗(yàn)室工作者在實(shí)驗(yàn)過程中準(zhǔn)確地分配和轉(zhuǎn)移液體,以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和重復(fù)性。 移液器的容量通常根據(jù)需要進(jìn)行調(diào)節(jié),可以選擇適合所需液體體積的容量。 以下,我們將通過4個(gè)方面的內(nèi)容幫助同學(xué)們學(xué)習(xí)和使用移液器:
1 選擇量程 “看”----看移液器的規(guī)格: 首先,我們需要知道的是,根據(jù)日常移液的需要,移液器也有很多規(guī)格,最常用到的幾種已在圖1展示(從左到右依次為0-1000μl,0-200μl,0-100μl,0.10μl以及0-2.5μl),此外還有0-20μl,0-5000μl等等。 量程在哪兒看呢?新手了解其規(guī)格主要看以下三處: 1. 槍身上一般會(huì)標(biāo)注; 2. 體積窗口(顯示最大量程哦); 3. 調(diào)節(jié)螺旋旁。
“選”----選擇合適量程范圍的移液器&選擇與移液器匹配的槍頭 通常來講,我們在準(zhǔn)備加樣時(shí)要選擇合適量程范圍的移液器(即所選的移液器量程要與吸樣體積相接近),這是加樣準(zhǔn)確的前提之一。 如:在同時(shí)擁有0-100ul與0-20ul的移液器時(shí),我們吸取15ul的樣本最好選用0-20ul量程的移液器。 此外,最常用的吸頭量程我們可以粗略地分為大、中、小三種(如圖2所示),如0-10ul的移液器要選小吸頭,0-100ul的移液槍要選中吸頭,而0-1000的移液槍要選大吸頭等等。 當(dāng)然啦,移液量越大所匹配的吸頭也是越大的(小Tip:新手不知怎么選吸頭的時(shí)候不妨看看吸頭錐的粗細(xì),其粗細(xì)與吸頭是匹配的哦。 常用吸頭展示 2 安裝吸頭 垂直拿起移液器,使其末端垂直插入吸頭中,左右微旋即可成功安裝吸頭。 切記: A:不可反復(fù)垂直撞擊安裝吸頭,以免損壞移液器; B:不可不安裝吸頭就吸樣! 3 吸液&排液
關(guān)于吸樣與放樣的幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn):
選擇量程
安裝吸頭
吸液&排液
注意事項(xiàng)
常用移液器展示
“調(diào)”——選好合適量程的移液器并安裝好槍頭后,調(diào)節(jié)移液器至我們需要的體積; “排”——按住移液器按鈕至第一檔,排除槍頭里的空氣; “吸”——將槍頭垂直伸入液面下,勻速放開移液器按鈕完成吸樣; “放”——?jiǎng)蛩侔聪乱埔浩靼粹o至二檔,完成放樣。
無論吸樣還是放樣,手持移液器時(shí)必須垂直,這是吸放樣準(zhǔn)確的關(guān)鍵; 吸放樣時(shí)必須勻速,不可突然松開或按動(dòng)按鈕,速度過快會(huì)導(dǎo)致吸樣不準(zhǔn)確以及放樣有殘留,并很容易產(chǎn)生氣泡,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果; 吸樣時(shí),槍頭伸入液面的深度也要注意,太深太淺均會(huì)造成加樣不準(zhǔn),太深會(huì)導(dǎo)致槍頭上帶有液體殘留,太淺有可能吸到空氣,要視我們吸樣體積的多少而定哦(注:此步也提醒大家在選擇槍頭時(shí)要選擇低吸附性槍頭,一是防止槍頭外液體掛壁,二是防止放液時(shí)槍頭內(nèi)液體殘留); 吸樣時(shí)一定要按住按鈕不動(dòng),待槍頭伸入液面下后再勻速放開按鈕;同理,放樣時(shí)一定要等槍頭離開液面后再松開按鈕,以防倒吸; 對于要求較高的實(shí)驗(yàn),槍頭必須高壓(也可直接購買無菌無酶的,但沒必要),高壓后的槍頭切忌不可再用手直接觸碰。
4 移液器使用注意事項(xiàng)
移液器使用完畢后均要調(diào)至最大量程,并掛在移液器架上; 吸取液體后或有液體殘留時(shí),禁止將移液器水平放置,以防液體倒流腐蝕移液器; 吸取揮發(fā)性較強(qiáng)的液體(如提取RNA要用到的氯仿)時(shí)可將槍頭潤洗幾次再吸樣,吸完液體后可稍將移液器傾斜(注:此處僅僅指吸完液體后往加樣容器轉(zhuǎn)移的過程,而非吸放樣過程,且傾斜角度不可過大哦)以防其滴落,且轉(zhuǎn)移過程要快; 對于粘稠性強(qiáng)的液體,吸樣時(shí)槍頭伸入液面下要多停留片刻,同時(shí)吸放樣的速度一定要慢(小tip:可以用剪刀剪去一小部分槍頭再吸樣,這樣就容易多了,但不能剪太多,否則液體會(huì)直接接觸到移液器,造成損壞哦)。