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實驗室中培養(yǎng)基的配制、滅菌和儲存的那些事

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-05-17
核心提示: 培養(yǎng)基可按處方配制,也可使用按處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基,或直接采用商品化的預(yù)制培養(yǎng)基。在制備培養(yǎng)基時,應(yīng)選擇
 培養(yǎng)基可按處方配制,也可使用按處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基,或直接采用商品化的預(yù)制培養(yǎng)基。
在制備培養(yǎng)基時,應(yīng)選擇質(zhì)量符合要求的脫水培養(yǎng)基或單獨配方組分進行配制。脫水培養(yǎng)基應(yīng)附有處方和使用說明,配制時應(yīng)按使用說明上的要求操作以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合要求,不得使用結(jié)塊、顏色發(fā)生變化或其他物理性狀明顯改變的脫水培養(yǎng)基。對于已開封的脫水培養(yǎng)基應(yīng)盡快使用,如果不能及時用完,可以進行存放效期驗證,確認最長存放周期。脫水培養(yǎng)基或單獨配方組分應(yīng)在適當(dāng)?shù)臈l件下貯藏,如建議按照使用說明書上的要求進行貯藏,如低溫、干燥和避光,所有的容器應(yīng)密封,尤其是盛放脫水培養(yǎng)基的容器。為保證培養(yǎng)基質(zhì)量的穩(wěn)定可靠,各脫水培養(yǎng)基或各配方組分應(yīng)準(zhǔn)確稱量,并要求有一定的精確度。配制培養(yǎng)基最常用的溶劑是純化水,特殊情況下,可能需要用去離子水和蒸餾水。應(yīng)記錄各稱量物的重量和水的使用量。
脫水培養(yǎng)基應(yīng)完全溶解于水中,再分裝與滅菌。配制時若需要加熱助溶,應(yīng)注意不要過度加熱,以避免培養(yǎng)基顏色變深。如需要添加其他組分時,加入后應(yīng)充分混勻。應(yīng)按照生產(chǎn)商提供或使用者驗證的參數(shù)進行培養(yǎng)基的滅菌。商品化的預(yù)制培養(yǎng)基必須附有所用滅菌方法的資料。培養(yǎng)基滅菌一般采用濕熱滅菌技術(shù),特殊培養(yǎng)基可采用薄膜過濾除菌。用于環(huán)境監(jiān)測的培養(yǎng)基需特別防護,以防止外來污染物的影響及避免出現(xiàn)假陽性結(jié)果,推薦用雙層包裝和終端滅菌。
培養(yǎng)基滅菌后不得貯藏在蒸汽滅菌柜中,瓊脂培養(yǎng)基不得在0℃或0℃以下存放,因為冷凍可能破壞凝膠特性。培養(yǎng)基保存應(yīng)防止水分流失,并在避光條件下。瓊脂平板最好現(xiàn)配現(xiàn)用,如置冰箱2~8℃保存,一般不超過1周,且應(yīng)密閉包裝,若延長保存期限,保存期需經(jīng)驗證確定。
固體培養(yǎng)基滅菌后的再融化只允許1次,以避免因過度受熱造成培養(yǎng)基質(zhì)量下降或微生物污染。培養(yǎng)基的再融化一般采用水浴或流通蒸汽加熱。融化的培養(yǎng)基應(yīng)置于45~50℃的環(huán)境中,不得超過8小時。傾注培養(yǎng)基時,應(yīng)擦干培養(yǎng)基容器外表面的水分,避免容器外壁的水滴進入培養(yǎng)基中造成污染。
 
編輯:songjiajie2010

 
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