首先,我們先了解一下什么是培養(yǎng)皿。
那么,培養(yǎng)皿接種后為什么要倒置培養(yǎng)呢?
主要原因有以下幾點:
當(dāng)我們剛剛倒完平板,并蓋上培養(yǎng)皿蓋后,培養(yǎng)基尚有余溫且剛凝固不久,此時的水分較大,濕度也相對較高。在皿蓋上,你會發(fā)現(xiàn)凝結(jié)了一些水珠。如果平板正放,這些冷凝的水滴會流到培養(yǎng)基里,不僅容易造成污染,還可能使培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿之間出現(xiàn)分離,導(dǎo)致平板在移動時容易滑動。此外,若培養(yǎng)基中的水分較大,在接種培養(yǎng)時,菌種會四處流動,使得長成的菌膜連在一起,給后續(xù)的計數(shù)工作帶來困難。
培養(yǎng)條件為必須通風(fēng)時,倒置的平板可以減少培養(yǎng)基表面的空氣流動,減慢培養(yǎng)基中水分蒸發(fā)的速度,保持瓊脂等固體培養(yǎng)基中的水分,充分的維持瓊脂等凝固劑的彈性,延長培養(yǎng)基出現(xiàn)干裂的時間。所以,倒置培養(yǎng)有利于菌種的繁殖和生存。如果將平板正放,大概幾天時間培養(yǎng)基就會出現(xiàn)水分散失和開裂的情況。可見,防止培養(yǎng)過程中水分散失是非常重要的。
倒置平板在拿取時能夠保持原狀,不易出現(xiàn)平板底部與蓋子分離的情況,從而避免環(huán)境中的雜菌污染。同時,倒置培養(yǎng)使得培養(yǎng)基表面的菌落相對不會太快擴(kuò)散,便于觀察和計數(shù)菌落特征。倒置平板使得觀察者可以從培養(yǎng)皿的底部觀察菌落,這有助于更清晰地觀察菌落的形態(tài)、大小和顏色等特征。
倒置平板有助于保持培養(yǎng)條件的一致性,因為所有平板都處于相同的環(huán)境條件下,有助于實驗結(jié)果的可重復(fù)性。
倒置培養(yǎng)時,由于平板內(nèi)的空氣不易流動,能盡可能的減少外來雜菌的侵染,避免雜菌污染培養(yǎng)基和培養(yǎng)物。通過實驗觀察,發(fā)現(xiàn)如果平板正放,平板的周邊容易長出雜菌菌落。
在培養(yǎng)過程中,我們可能需要多次打開培養(yǎng)箱取放平板。如果平板正放,不小心容易將皿蓋掀開,增加污染的風(fēng)險。而倒置的平板在拿取時能夠保持原狀,不易出現(xiàn)皿底和皿蓋分離的情況,從而避免環(huán)境中雜菌的污染。
那么如何正確的倒置培養(yǎng)皿呢?
現(xiàn)在總結(jié)幾點小技巧供大家參考:
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使用已消毒的平板,并在無菌條件下操作。
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佩戴干凈的無菌手套,以防止細(xì)菌和其他微生物的污染。
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倒置平板時,應(yīng)將平板的蓋子倒置放置,以便讓蓋子在下、平板底在上。這樣可以防止平板蓋上的水分滴到培養(yǎng)基上造成污染。
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放置平板時要小心,避免顛簸和震動。
1.擴(kuò)大培養(yǎng),一般用液體培養(yǎng)基,不能倒置。
2.其實還有一些平板培養(yǎng)的情況是可以不用倒置的,比如在瓊脂平板上進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),是用已經(jīng)純化的單一菌種,接種比較大的量(比正常計數(shù)量要大,通常100毫米平板接種0.5毫升)到平板上,通過培養(yǎng)讓菌長滿整個平板,再加點無菌水用L形涂板器把菌刮下來。有些特定研究會用這種擴(kuò)大培養(yǎng)的方法(而不是液體培養(yǎng)基培養(yǎng)后離心),這種培養(yǎng)理論上來說平板可以不用倒置,因為不存在冷凝水滴落造成菌種污染的問題(畢竟用的已經(jīng)是純化菌種了)。