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722型分光光度計的使用方法

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2010-11-24
核心提示:722型分光光度計的使用方法

一、 測量原理
分光光度法測量的理論依據(jù)是伯郎—比耳定律:當容液中的物質(zhì)在光的照射和激發(fā)下,產(chǎn)生了對光吸收的效應(yīng)。但物質(zhì)對光的吸收是有選擇性的,各種不同的物質(zhì)都有其各自的吸收光譜。所以根據(jù)定律當一束單色光通過一定濃度范圍的稀有色溶液時,溶液對光的吸收程度A與溶液的濃度c(g/l)或液層厚度b(cm)成正比。其定律表達式A=abc
(a是比例系數(shù))。當c的單位為mol/l時,比例系數(shù)用ε表示,則A=εbc稱為摩爾吸光系數(shù)。其單位為L•mol-1•cm-1它是有色物質(zhì)在一定波長下的特征常數(shù)。
T(透光率)=I/I0 A(吸光度)= -lgT 或 A=K•C•L(比色皿的厚度)
測定時,入射光I,
吸光系數(shù)和溶液的光徑長度不變時,透過光是根據(jù)溶液的濃度而變化的,即“K”為常數(shù)。比色皿厚度一定,“L”、“I0”也一定。只要測出A即可算出“C”。 
二、 722型分光光度計的使用
1、將靈敏度旋鈕調(diào)至“1”檔(信號放大倍率最小)。
2、開啟電源,指示燈亮 ,選擇開關(guān)置于“T”,波長調(diào)至到測試用波長。儀器預(yù)熱20分鐘。
3、打開試樣室(光門自動關(guān)閉),調(diào)節(jié)透光率零點旋鈕,使數(shù)字顯示為000.0。(調(diào)節(jié)100%T旋鈕),蓋上試樣室蓋,將比色皿
架處于蒸餾水校正位置,使光電管受光,調(diào)節(jié)透光率100%旋鈕使數(shù)字顯示100.0。如顯示不到100.0,則可適當增加微電流放大的倍數(shù)。(增加靈敏度
的檔數(shù)同時應(yīng)重復(fù)(3)調(diào)節(jié)儀器透光率的“0”位)但盡量使倍率置于低檔使用。這樣儀器會有更高的穩(wěn)定性。
4、預(yù)熱后,按(3)連續(xù)幾次調(diào)整透光率的“0”位和“100%”的位置,待穩(wěn)定后儀器可進行測定工作。
三、 吸光度“A”的測量
將選擇開關(guān)置于A 。調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零旋鈕,使得數(shù)字顯示為零,然后將被測樣品移入光路,顯示值即為被測樣品的吸光度值。
四、 濃度c的測量
將選擇開關(guān)由“A”旋至“C”將已標定濃度的樣品放入光路,調(diào)節(jié)濃度旋鈕,使得數(shù)字顯示為標定值,將被測樣品放入光路即可讀出被測樣品的濃度值。
注意事項:
1、測量完畢,速將暗盒蓋打開,關(guān)閉電源開關(guān),將靈敏度旋鈕調(diào)至最低檔,取出比色皿,將裝有硅膠的干燥劑袋放入暗盒內(nèi),關(guān)上蓋子,將比色皿中的溶液倒入燒杯中,用蒸餾水洗凈后放回比色皿盒內(nèi)。
2、每臺儀器所配套的比色皿不可與其它儀器上的表面皿單個調(diào)換。
使用方法
(1)預(yù)熱儀器 將選擇開關(guān)置于“T”,打開電源開關(guān),使儀器預(yù)熱20分鐘。為了防止光電管疲勞,不要連續(xù)光照,預(yù)熱儀器時和不測定時應(yīng)將試樣室蓋打開,使光路切斷。
(2)選定波長 根據(jù)實驗要求,轉(zhuǎn)動波長手輪,調(diào)至所需要的單色波長。
(3)固定靈敏度檔 在能使空白溶液很好地調(diào)到“100%”的情況下,盡可能采用靈敏度較低的擋,使用時,首先調(diào)到“1”擋,靈敏度不夠時再逐漸升高。但換擋改變靈敏度后,須重新校正“0%”和“100%”。選好的靈敏度,實驗過程中不要再變動。
(4)調(diào)節(jié)T=0% 輕輕旋動“0%”旋鈕,使數(shù)字顯示為“00.0”,(此時試樣室是打開的)。
(5)調(diào)節(jié)T=100% 將盛蒸餾水(或空白溶液,或純?nèi)軇┑谋壬蠓湃氡壬笞苤械牡谝桓駜?nèi),并對準光路,把試樣室蓋子輕輕蓋上,調(diào)節(jié)透過率“100%”旋鈕,使數(shù)字顯示正好為“100.0”。
(6)吸光度的測定 將選擇開關(guān)置于“A”,蓋上試樣室蓋子,將空白液置于光路中,調(diào)節(jié)吸光度調(diào)節(jié)旋鈕,使數(shù)字顯示為“.000”。將盛有待測溶液的比色皿放入比色皿座架中的其它格內(nèi),蓋上試樣室蓋,輕輕拉動試樣架拉手,使待測溶液進入光路,此時數(shù)字顯示值即為該待測溶液的吸光度值。讀數(shù)后,打開試樣室蓋,切斷光路。
重復(fù)上述測定操作1-2次,讀取相應(yīng)的吸光度值,取平均值。
(7)濃度的測定 選擇開關(guān)由“A”旋置“C”,將已標定濃度的樣品放入光路,調(diào)節(jié)濃度旋鈕,使得數(shù)字顯示為標定值,將被測樣品放入光路,此時數(shù)字顯示值即為該待測溶液的濃度值。
(8)關(guān)機 實驗完畢,切斷電源,將比色皿取出洗凈,并將比色皿座架用軟紙擦凈。
編輯:songjiajie2010

 
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