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紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的原理及問(wèn)題解決方案

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2016-12-13  來(lái)源:食品實(shí)驗(yàn)室服務(wù)公眾號(hào)
核心提示:紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是分析測(cè)試實(shí)驗(yàn)室里常見(jiàn)的一種分析儀器,屬于光學(xué)儀器的一種,可廣泛應(yīng)用于醫(yī)療衛(wèi)生、化學(xué)化工、環(huán)保、地質(zhì)、機(jī)械、冶金、石油、食品、生物、材料、計(jì)量科學(xué)、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、漁業(yè)等領(lǐng)域中的科研、教學(xué)等各個(gè)方面,用來(lái)進(jìn)行定性分析、純度檢查、結(jié)構(gòu)分析、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定、反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究等。

一、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的誕生
 
  世界首臺(tái)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)誕生于1918年的美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)局。后來(lái)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)經(jīng)不斷改進(jìn),又出現(xiàn)自動(dòng)記錄、自動(dòng)打印、數(shù)字顯示、微機(jī)控制等各種類(lèi)型的儀器,使光度法的靈敏度和準(zhǔn)確度也不斷提高,其應(yīng)用范圍也在不斷擴(kuò)大。紫外可見(jiàn)分光光度法從問(wèn)世以來(lái),在應(yīng)用方面有了很大的發(fā)展,尤其是在相關(guān)學(xué)科發(fā)展的基礎(chǔ)上,促使分光光度計(jì)儀器的不斷創(chuàng)新,功能更加齊全,使得光度法的應(yīng)用更拓寬了范圍。
 
二、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的工作原理
 
1 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)基本工作原理和紅外光譜儀相似,利用一定頻率的紫外可見(jiàn)光照射被分析的有機(jī)物質(zhì),引起分子中價(jià)電子的躍遷,它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長(zhǎng)而變化的光譜,反映了試樣的特征。
2 紫外可見(jiàn)光的范圍內(nèi),對(duì)于一個(gè)特定的波長(zhǎng),吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度,因此測(cè)量光譜可以進(jìn)行定性分析,而且根據(jù)吸收與已知濃度的標(biāo)樣的比較,還能進(jìn)行定量分析。
 
三、首次使用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)人員須知
 
1 首次使用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的人員,一般來(lái)說(shuō),一定要詳細(xì)閱讀儀器安全操作手冊(cè),否則嚴(yán)禁操作儀器。準(zhǔn)備操作儀器前,需要先查看一下指針儀器在斷電的情況下,表面指針是否指向零刻度。如若不是,理應(yīng)先調(diào)零然后才能連接電源。在使用的過(guò)程中,操作員應(yīng)該盡量避免對(duì)鏡燈的觸碰,放大器使用過(guò)后,一定需要把檔位歸置到零。
2 除此之外,在操作紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)時(shí),操作人員需要留意一下機(jī)器的干燥劑,因?yàn)檫@是非常重要的。通常情況下,干燥劑有效時(shí),儀器的工作是不會(huì)出現(xiàn)任何問(wèn)題的?墒钱(dāng)干燥劑失效之后,所出現(xiàn)的問(wèn)題是非常嚴(yán)重的。除了儀器上面顯數(shù)不準(zhǔn)之外,很容易使反射鏡變得污穢,從而使得光線率不準(zhǔn)確。因此,日常使用儀器時(shí),一定要注意干燥是否有效。當(dāng)發(fā)現(xiàn)失效后,要及時(shí)進(jìn)行更換。

 四、分光光度計(jì)使用注意事項(xiàng)
 
1 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)在開(kāi)機(jī)前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出,儀器自檢過(guò)程中禁止打開(kāi)樣品室蓋。
2 筆試PH計(jì)測(cè)定時(shí),禁止將試劑或液體物質(zhì)放在儀器的表面上,如有溶液溢出或其它原因?qū)悠凡叟K,要盡可能及時(shí)清理干凈。
3 比色皿內(nèi)溶液以皿高的2/3~4/5為宜,不可過(guò)滿(mǎn)以防液體溢出腐蝕儀器。測(cè)定時(shí)應(yīng)保持比色皿清潔,池壁上液滴應(yīng)用擦鏡紙擦干,切勿用手捏透光面。測(cè)定紫外波長(zhǎng)時(shí),需選用石英比色皿。
4 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將比色皿中的溶液倒盡,然后用蒸餾水或有機(jī)溶劑沖洗比色皿至干凈,倒立晾干。關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi),蓋上防塵罩,做好使用登記,得到管理老師認(rèn)可方可離開(kāi)。
 
五、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)出現(xiàn)問(wèn)題處理方法
 
1 儀器電源接通后,光源不亮。
原因:
①光源燈泡已損壞。
②保險(xiǎn)管燒壞。
處理方法:
①更換氘燈或鎢燈。
②更換保險(xiǎn)管。
2 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)噪音較大。
原因:
光源燈泡使用時(shí)間超過(guò)壽命期。
處理方法:
更換光源燈泡。
3 自檢時(shí)提示波長(zhǎng)自檢出錯(cuò)。
原因:
自檢過(guò)程中可能打開(kāi)過(guò)儀器樣品室的蓋子。
處理方法:
關(guān)上儀器樣品室蓋子,重新自檢。
4 儀器自檢時(shí)提示通訊錯(cuò)誤。
原因:
儀器與電腦之間的數(shù)據(jù)線沒(méi)有連接好。
處理方法:
連接好數(shù)據(jù)線,重新打開(kāi)儀器和軟件,重新自檢。
5 儀器零點(diǎn)飄忽不定,主要反映在簡(jiǎn)易儀器上。
原因:
在簡(jiǎn)易儀器中,零點(diǎn)往往是通過(guò)電位器來(lái)調(diào)整,這種電位器一般是炭膜電阻制作的,使用久了往往造成接觸不良。
處理方法:
更換電位器。
6 在使用過(guò)程中,出現(xiàn)數(shù)字顯示不能歸零,同時(shí)伴有圖線記錄基線位置偏高。
原因:
①光電倍增等老化,性能降低。
②信號(hào)處理板可能發(fā)生故障。
③前置放大版出現(xiàn)故障,引起反饋量增大
處理方法:
①開(kāi)機(jī)通電,先做記錄故障曲線,再與原始記錄的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)照,找出異同點(diǎn),并作一下定性定能分析。然后用一只同型號(hào)規(guī)格的新光電倍增管替換機(jī)上的光電管,再開(kāi)機(jī)實(shí)驗(yàn),結(jié)果記錄出來(lái)的圖線并沒(méi)有什么變化,由此證明光電倍增管沒(méi)有老化變質(zhì)。
②進(jìn)一步檢查信號(hào)處理板,未發(fā)現(xiàn)信號(hào)處理板各元器件損壞,對(duì)影響靈敏度有關(guān)的電位器檢測(cè),結(jié)果測(cè)得數(shù)據(jù)正常,這說(shuō)明信號(hào)處理板沒(méi)有故障。
7 測(cè)試過(guò)程中提示能量太低。
原因:
①光源燈泡使用時(shí)間超過(guò)壽命期。
②樣池中有不透光的東西擋住了光。
處理方法:
①更換光源燈。
②拿走擋光的物品。
8 吸光值結(jié)果出現(xiàn)負(fù)值(最常見(jiàn))。
原因:
沒(méi)做空白記憶、樣品的吸光值小于空白參比液。
處理方法:
做空白記憶、調(diào)換參比液或用參比液配置樣品溶液。
9 當(dāng)儀器波長(zhǎng)固定在某個(gè)波長(zhǎng)下時(shí),吸光值信號(hào)上下擺動(dòng),特別是測(cè)量模式轉(zhuǎn)換為按鍵開(kāi)關(guān)式的簡(jiǎn)易儀器。
原因:
開(kāi)關(guān)觸點(diǎn)因長(zhǎng)期氧化所致造成接觸不良。
處理方法:
用金屬活化劑清洗按鍵觸點(diǎn)即可。
10 樣品信號(hào)重現(xiàn)性不良
原因:
排除儀器本身的原因外,最大的可能是樣品溶液不均勻所致,在簡(jiǎn)易的單光束儀器中,樣品池架一般為推拉式的,有時(shí)重復(fù)推拉不在同一個(gè)位置上。
處理方法:
①采取正確的試樣配置手段。
②修理推拉式樣品架的定位碰珠。
編輯:foodec007

 
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