亚洲欧美日韩国产综合网_自拍视频精品一区二区三区_无码激情AV一区二区三区_二天天AV综合网

食品伙伴網(wǎng)服務號
當前位置: 首頁 » 儀器設備 » 理化檢測儀器 » 色譜分析儀器 » 正文

新買的色譜柱活化和使用,注意了!

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2023-10-30
核心提示:色譜柱是高效液相色譜儀最主要的部件,被測物質(zhì)能否被很好的分離和測定,色譜柱的性能起著決定性的作用。因此,在日常工作中,應
色譜柱是高效液相色譜儀最主要的部件,被測物質(zhì)能否被很好的分離和測定,色譜柱的性能起著決定性的作用。因此,在日常工作中,應特別注意色譜柱的正確使用和維修保養(yǎng),以延長色譜柱的使用壽命。

01 色譜柱的活化

反相色譜柱:使用新的C18柱時,先用甲醇或乙腈沖洗20-30個柱體積,然后用甲醇/乙腈:水(50:50)沖洗10個柱體積,然后再用流動相平衡10-30柱體積。


正相色譜柱:新柱用流動相平衡20-30個柱體積。


離子色譜柱(SAX, SCX):新柱先用100%甲醇或乙腈沖洗20個柱體積,然后轉(zhuǎn)換到流動相平衡。



部分品牌的氨基柱和氰基柱是保存在正相流動相中,用于反相色譜時,先用異丙醇或乙醇沖洗色譜柱50-100個柱體積。



當用HILIC模式時,新柱用50倍柱體積50/50乙腈/水活化平衡,然后再用流動相平衡20個柱體積。



02 色譜柱的日常保存

反相柱:100%甲醇或乙腈保存。

正相柱:異丙醇或正己烷保存。

離子交換柱:100%甲醇,或大于40%的有機相保存。

切忌用緩沖鹽保存色譜柱。


03 色譜柱的清洗和再生

反相C18色譜柱

清洗:每天柱子使用完后,立刻沖洗,如果使用緩沖液,必須先用相同比例的有機相/水沖洗20個柱體積,然后再轉(zhuǎn)換到100%有機相沖洗20個柱體積。

再生:用100%水,甲醇,三氯甲烷,甲醇,100%水分別沖洗20個柱體積,在第一次用100%水時,進樣5次200 μL二氯亞砜DMSO。

正相色譜柱

清洗:每次清洗都用低流速起步,當檢測到柱壓穩(wěn)定在一定水平后再增加流速。先用10柱體積不含其它添加劑的流動相中的弱溶劑,如正己烷、氯仿等反沖色譜柱。再用20柱體積的諸如二氯甲烷或異丙醇等流動相中的強溶劑反沖色譜柱。

再生:用四氫呋喃,甲醇,四氫呋喃,二氯甲烷,正己烷分別沖洗20個柱體積。

離子色譜柱

清洗:用100%水沖洗30個柱體積去除鹽,然后用100%甲醇或乙腈沖洗20個柱體積后保存在50%甲醇或乙腈中。

再生:先用高濃度鹽的緩沖液清洗(濃度可以是5-10倍,不超過1M),然后再用100%水洗,100%乙腈或甲醇清洗,再用50%乙腈或甲醇保存。

04 色譜柱日常使用保養(yǎng)

使用預柱保護分析柱(硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度)

注意色譜的pH范圍,大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2-8

避免流動相組成及極性的劇烈變化

使用HPLC級試劑,流動相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理

如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相,應在實驗完畢將柱子沖洗干凈并保存在乙腈中

壓力升高是需要更換預柱的信號

確認流動相中緩沖鹽的溶解性

確認樣品在流動相中的溶解性

避免壓力的突變


文章(文字)來源:網(wǎng)絡 
編輯:songjiajie2010

 
分享:
 

 
 
推薦圖文
推薦儀器設備
點擊排行
 
 
Processed in 0.093 second(s), 19 queries, Memory 0.89 M