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高效液相色譜法是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測，從而實(shí)現(xiàn)對試樣的分析。但是作為一個相對復(fù)雜的儀器，在使用過程中你是不是遇到了關(guān)于HPLC的各種惱人的問題？以下內(nèi)容或許能幫到您。01 壓力異常（一）無壓力顯示、無流動相流動
1. 泵未啟動
解決方法：
①設(shè)置適合的泵流量
②溶劑管理器中設(shè)置充足的溶劑余量。
2. 工作站未正常連接
儀器指示燈常亮
（1）網(wǎng)線/USB線異常
解決方法：更換網(wǎng)線/USB線
（2）工作站端口未設(shè)置
解決方法：設(shè)置工作站端口
（3）電腦IP與工作站IP沖突
解決方法：修改電腦IP
儀器狀態(tài)燈閃爍
（1）CAN線連接異常
解決方法：重新拔插一下CAN線
（2）通訊板燈異常
解決方法：更換通訊板
3. 柱塞桿折斷
解決方法：更換柱塞桿
4. 泵頭內(nèi)有空氣
解決方法：
①溶劑脫氣
②打開旁路放空閥5mL/min高流量放空。
5. 流動相不足
解決方法：補(bǔ)充流動相
6. 過濾沉子堵塞
解決方法：更換過濾沉子
7. 單向閥損壞
解決方法：更換單向閥
8. 漏液
解決方法：擰緊或更換相應(yīng)漏液部件。
（二）流動相流動正常但沒有壓力顯示
旁路放空閥組件損壞
解決方法：更換旁路放空閥組件
（三）壓力持續(xù)偏高/不斷升高
1. 保護(hù)柱阻塞
解決方法：清洗或更換保護(hù)柱
2. 流速設(shè)定過高
解決方法：調(diào)整流速設(shè)定
3. 柱前篩板堵塞
解決方法：
①在允許情況下反沖色譜柱
②更換篩板
③更換色譜柱
4. 流動相使用不當(dāng)或緩沖鹽結(jié)晶沉淀
解決方法：
①使用恰當(dāng)?shù)牧鲃酉?/span>
②沖洗色譜柱
5. 色譜柱選擇不當(dāng)
解決方法：選擇恰當(dāng)?shù)纳V柱
6. 進(jìn)樣閥損壞
解決方法：清洗或更換進(jìn)樣閥
7. 柱溫過低
解決方法：提高柱溫
8. 工作站失常
解決方法：
①工作站問題。更換工作站
②電腦版本和工作站沖突。更換推薦配置的電腦。
9. 在線過濾器阻塞
解決方法：清洗或更換在線過濾器
（四）壓力持續(xù)偏低/不斷下降
1. 系統(tǒng)漏液
解決方法：確定漏液位置并維修
2. 流速設(shè)定過低
解決方法：調(diào)整流速
3. 色譜柱選擇不當(dāng)
解決方法：選擇適合的色譜柱
4. 柱溫過高
解決方法：降低溫度
5. 控制器失常
解決方法：維修或更換控制器
6. 工作站失常
解決方法：
①更換工作站
②電腦版本與工作站沖突，更換推薦配置的電腦
（五）壓力波動
1. 泵中有氣體
解決方法
①溶劑脫氣
②除去泵中氣體
2. 單向閥損壞
解決方法：更換單向閥
3. 泵密封損壞
解決方法：更換密封圈
4. 脫氣不充分
解決方法：
①溶劑脫氣
②改變脫氣方法（使用在線脫氣法等）
5. 系統(tǒng)漏液
解決方法:確定漏液位置并維修
6. 使用梯度洗脫，由于流動相粘度的變化引起的壓力波動。02漏液
（一）接頭處漏液
1. 接頭問題
解決方法：
①接頭的松緊應(yīng)適當(dāng)，不宜過松或者過緊。
②接頭污染應(yīng)拆下清洗或者更換
2. 接頭處連接管未正常連接
解決方法：
①擰松接頭，先將連接管固定或壓到底，再擰緊接頭
②韌環(huán)或連接管發(fā)生不可恢復(fù)的變形引起的漏液，更換韌環(huán)或連接管路。
3. 部件不匹配
解決方法：使用同一品牌的配件
（二）泵漏液
1. 單向閥松動
解決方法：
①擰緊單向閥（不必擰的過緊）
②更換單向閥
2. 接頭松動
解決方法：將接頭擰到合適的程度。
3. 泵密封損壞
解決方法：維修更換密封圈。
4. 旁路放空閥組件損壞
解決方法：
①擰緊旁路放空閥
②維修或更換旁路放空閥
5. 比例閥損壞
解決方法：
①檢查隔膜，如果漏液立即更換
②更換墊片
（三）檢測器漏液
1. 流通池墊片損壞
解決方法：
①避免過大的背景壓力（壓力降低）
②更換墊片
2. 流通池破碎
解決方法：更換窗口
3. 手緊接頭漏液
解決方法：擰緊或更換
4. 廢液管堵塞
解決方法：更換廢液管
5. 流通池堵塞
解決方法：重新安裝或更換當(dāng)儀器的CAN線都已經(jīng)正常連接，且儀器處于打開狀態(tài)，通訊板上的指示燈處于閃爍的狀態(tài)。若通訊板上的指示燈不亮或常亮，為通訊板異常。通訊板的指示燈不亮，可能是通訊板未接通電源。檢查儀器是否開機(jī)，CAN線是否有松動情況。若通訊板常亮，為通訊板異常，更換通訊板。
若輸液泵中存在大量的氣泡或新儀器安裝時，使流動相充滿溶劑瓶到輸液泵的管路，并檢查泵上各個接頭處，確保儀器未漏液。然后將旁路放空閥上接到進(jìn)樣器的管路卸下，用堵頭堵住。打開旁路放空閥，5mL/min的流量沖洗并隔個1分鐘左右，將旁路防空閥旋緊2～3s觀察工作站中的壓力顯示，壓力不得超過25MPa，然后迅速旋松，不斷循環(huán)此操作5分鐘。將旁路放空閥到進(jìn)樣器的管路連接好，觀察輸液泵是否正常吸液或壓力波動是否好轉(zhuǎn)，若現(xiàn)象有好轉(zhuǎn)，但仍然壓力波動較大，則重復(fù)此操作至壓力平穩(wěn)。
