下列步驟請(qǐng)?jiān)跓o(wú)菌環(huán)境下操作：
1、以沾有70%酒精的棉花，擦拭外管，在火焰上加熱外管之尖端。
2、滴數(shù)滴無(wú)菌水于加熱處，使外管破裂，再以硬棒敲破尖端。
3、取出隔熱纖維紙和內(nèi)管，以滅菌過(guò)的鑷子取出內(nèi)管之棉塞。
4、( a ) 適用于細(xì)菌
用無(wú)菌吸管，吸取0.3-0.5 ml指定之液體培養(yǎng)基，滴入內(nèi)管內(nèi)，并輕微震蕩（可用該吸管協(xié)助），直到均勻懸浮。
( b ) 適用于霉菌、酵母菌
用無(wú)菌吸管，吸取0.3-0.5 ml無(wú)菌水，滴入內(nèi)管內(nèi)，待干燥粉末溶解后，以無(wú)菌吸管吸取并滴入約含有5ml無(wú)菌水之試管內(nèi)，輕微震蕩使其均勻后，靜置30至60分鐘。
5、取0.1-0.2 ml之菌體懸浮液于指定的平板培養(yǎng)基上，做劃線分離培養(yǎng)或做成一系列之稀釋，用無(wú)菌L型玻棒均勻涂抹，以檢驗(yàn)菌種之純度及活化情形，而剩余的菌體則全部移入指定的液體培養(yǎng)基內(nèi)，并依指定的溫度培養(yǎng)之。
6、某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后，遲滯期 ( lag period ) 較長(zhǎng)，必須等培養(yǎng)二倍時(shí)間后才能長(zhǎng)出，且再經(jīng)過(guò)一、二次繼代培養(yǎng) (Subculture) 后才能正常生長(zhǎng)。經(jīng)過(guò)以上的努力后仍培養(yǎng)失敗，才視為不能活化。
7、若菌種未能活化，或活化之菌落有疑問(wèn)時(shí)，請(qǐng)于收到菌種之一個(gè)月內(nèi)，以問(wèn)題菌株反應(yīng)單傳真至本中心，即進(jìn)行處理。
8．未開(kāi)封之冷凍干燥管，請(qǐng)冷藏于4℃冰箱，切勿冷凍保存。