做為「定量擔(dān)當(dāng)」,移液器是實(shí)驗(yàn)過程中必不可少的神器,而這小小的移液器,也給大家?guī)?lái)了大大的困擾:
師妹想不通,剛剛校準(zhǔn)過的移液器,為什么配制溶液的時(shí)候有誤差呢?
老板也是百思不得其解,買了那么多高端移液器,怎么總是有人用不好呢?
其實(shí),好多問題都是移液器使用不當(dāng)或保養(yǎng)不及時(shí)造成的:
吸液時(shí)拇指迅速放開,這樣會(huì)迫使液體形成湍流狀態(tài),液體會(huì)直接沖到移液器內(nèi)部,導(dǎo)致移液器失準(zhǔn)。
日常除了移液器內(nèi)部清潔,外部也很重要,可以用95%酒精或60% 的異丙醇,再用蒸餾水擦拭,自然晾干。
小小的移液器藏著大大的學(xué)問,正確使用,定期維護(hù),合理管理,從此,師妹不再頭禿。那么這些移液器知識(shí),你又了解多少?
1槍頭的裝配
如果你還使勁在槍頭盒子上敲幾下來(lái)套上槍頭,趕緊收手!這樣會(huì)導(dǎo)致槍的內(nèi)部配件(如彈簧)因敲擊產(chǎn)生的瞬時(shí)撞擊力而變得松散,甚至?xí)䦟?dǎo)致刻度調(diào)節(jié)旋鈕卡住甚至?xí)䦟審椛涮淄舱蹟唷?/span>
正確的做法應(yīng)該是:將槍垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動(dòng)1/4或1/2圈即可使其緊密結(jié)合。多道(如8道或12道)移液槍,可將移液槍的第一道對(duì)準(zhǔn)第一個(gè)槍頭,然后傾斜地插入,往前后方向搖動(dòng)即可卡緊。槍頭卡緊的標(biāo)志是略微超過O型環(huán),并可以看到連接部分形成清晰的密封圈。
2量程的調(diào)節(jié)
從大體積到小體積,按照正常的調(diào)節(jié)方法,逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)旋鈕即可;從小體積到大體積,則先順時(shí)針旋轉(zhuǎn)刻度旋鈕至超過量程的刻度(繼續(xù)旋轉(zhuǎn)活塞按鈕約1/3圈),再回調(diào)至設(shè)定體積,這樣可以保證量取的最高精確度。在該過程中,千萬(wàn)不要將按鈕旋出量程,否則會(huì)卡住內(nèi)部機(jī)械裝置而損壞了移液槍。
通常,移液器推薦在35-100%量程范圍內(nèi)操作。
3潤(rùn)洗
除了普通液體潤(rùn)洗以外,在吸取有機(jī)溶劑或高揮發(fā)性液體時(shí),揮發(fā)性氣體會(huì)在白套筒室內(nèi)形成負(fù)壓,從而產(chǎn)生漏液的情況,這時(shí)就需要預(yù)洗4~6次,讓白套筒室內(nèi)的氣體達(dá)到飽和,負(fù)壓就會(huì)自動(dòng)消失。
注:高溫或者低溫(冰點(diǎn)以下)液體請(qǐng)不要潤(rùn)洗!可以考慮活塞外置式移液器。
4移液
1)移液浸入的角度:保持垂直狀態(tài),最多不能超過20°。傾斜吸液會(huì)造成氣壓面的改變,增大移液誤差。
2)吸頭浸入深度:(如下圖)正確的吸頭浸入深度可以有效的減少取液誤差。
3)吸液速度:勻速。
過快的吸液速度,容易使樣品形成漩渦,產(chǎn)生氣泡;樣品液易進(jìn)入套柄,對(duì)活塞和密封圈造成損傷 ;帶入氣霧造成樣品的交叉污染;特別是1ml以上的液體,很容易造成液體上沖。吸完后最好能在液面內(nèi)停留1-3秒。
4)排液及吹液:
排液:將活塞按壓至第一檔排液;
吹液:繼續(xù)下壓活塞按鈕,到達(dá)第二停止點(diǎn)或通過第二停止點(diǎn)直至底部。
5)移液器必須卸掉槍頭后才可以平放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,因?yàn)槿魏螝埩舻囊后w都會(huì)在平放時(shí)倒流回吸液桿。
5維護(hù)與保養(yǎng)
1)如果移液器每天都需要使用,則建議每三個(gè)月或半年清潔并校準(zhǔn)一次。
2)如較長(zhǎng)時(shí)間不使用,要把移液槍的量程調(diào)至最大值的刻度,使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護(hù)彈簧,不注意此點(diǎn)容易導(dǎo)致活塞無(wú)法回彈。
3)如液體不小心進(jìn)入活塞室需及時(shí)清除污染物。
4)高溫消毒之前,要確保移液器能適應(yīng)高溫,避免放在較高溫處變形,致漏液或不準(zhǔn)。
5)在吸取過高揮發(fā)、高腐蝕液體后,應(yīng)將整支移液器拆開,用蒸餾水沖洗活塞桿及白套筒內(nèi)壁,并在晾干后安裝使用,以免揮發(fā)性氣體長(zhǎng)時(shí)間吸附于活塞桿表面,對(duì)活塞桿產(chǎn)生腐蝕,損壞移液器。
6期間核查
大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室對(duì)移液器的核查周期為一年或半年。要知道,移液器受環(huán)境和操作所造成的系統(tǒng)誤差極其明顯,最終可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的偏離;定期的期間核查,可使檢測(cè)儀器始終處于受控狀態(tài),從而確保儀器的穩(wěn)定,保證測(cè)量結(jié)果的可靠性。
移液器定期核查的必要性
移液器現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于食品藥品檢測(cè)分析方法中。但是,微小的誤差對(duì)取樣總量的影響非常大,合格可調(diào)移液器使用一段時(shí)間后,由于磨損、彈簧彈力變化等原因?qū)е聹?zhǔn)確度和精密度下降,必須進(jìn)行校準(zhǔn)。據(jù)報(bào)道,新購(gòu)置的移液器失準(zhǔn)率為1.56%,使用1萬(wàn)次以下的失準(zhǔn)率為4%,1萬(wàn)~5萬(wàn)次失準(zhǔn)率為8.82%,5萬(wàn)~10萬(wàn)次失準(zhǔn)率為21.7%,10萬(wàn)次以上失準(zhǔn)率為47.6%。
在設(shè)備的兩次校準(zhǔn)之間或儀器維修后投入使用前進(jìn)行期間核查,驗(yàn)證設(shè)備是否保持校準(zhǔn)時(shí)的狀態(tài),確保檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和有效性。
期間核查的內(nèi)容步驟
移液器主要用于在實(shí)驗(yàn)或生產(chǎn)中作液體的取樣或加液用。它利用空氣排放原理進(jìn)行操作,以活塞在活塞套內(nèi)移動(dòng)的距離確定移液器的容量。移液器為量出式量器,分定量式移液器和可調(diào)移液器兩大類。其型式分為單頭型和多頭型。其結(jié)構(gòu)由顯示窗、容量調(diào)節(jié)部件、活塞、活塞套、吸液管和吸液嘴等部分組成。
1.核查條件
檢測(cè)環(huán)境:移液器應(yīng)在15℃~25℃室溫下檢驗(yàn),待檢的移液器和檢測(cè)用的超純水應(yīng)與室溫一致。
檢測(cè)介質(zhì):超純水
檢測(cè)所需的設(shè)備:
檢測(cè)項(xiàng)目:外觀、密合性、容量。
移液器塑料件外殼表面應(yīng)平整、光滑,不得有明顯的縮痕、廢邊、裂紋、氣泡和變形等現(xiàn)象,金屬件表面鍍層應(yīng)無(wú)脫落、銹蝕和起層。
移液器主體應(yīng)具有下列標(biāo)記:產(chǎn)品名稱、制造廠或商標(biāo)、標(biāo)稱容量(μl或ml)、型號(hào)規(guī)格、出廠編號(hào)。
活塞:按動(dòng)移液器活塞時(shí),上、下移動(dòng)應(yīng)靈活,分檔界限明顯,按動(dòng)活塞應(yīng)不引起顯示窗數(shù)值的改變。
調(diào)節(jié)器:移液器的顯示窗在容量調(diào)節(jié)動(dòng)作時(shí),應(yīng)轉(zhuǎn)動(dòng)靈活,數(shù)字指示清晰、完整。
吸液嘴:吸液嘴在正常使用下內(nèi)壁應(yīng)不產(chǎn)生液滴,吸、放液體流暢。
2.檢測(cè)方法
1.外觀檢驗(yàn)
目測(cè)被檢移液器,外觀應(yīng)符合上文要求。
2.密合性檢驗(yàn)
將移液器調(diào)至可標(biāo)稱容量的最大值,選擇與吸引桿配套的吸液嘴。在移液器的吸引桿的下端,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)吸液嘴,以保證移液器的密封性; 如果移液器使用200μl或1000μl吸液嘴,吸入液體,并將吸液嘴朝下懸垂20s,觀察是否有液體溢出吸液嘴,如果有則移液器密合性不符合要求。
如果移液器使用10μl吸液嘴,將吸液嘴插入液面下2-3mm處,觀察是否有液體進(jìn)入吸液嘴,如果有則移液器密合性不符合要求。
3.容量檢驗(yàn)
(1)選擇檢測(cè)點(diǎn),定量移液器為定量的體積,可調(diào)移液器為可標(biāo)稱容量的最大值、標(biāo)稱容量最大值的一半、標(biāo)稱容量的最小值;同時(shí)選擇與吸引桿配套的吸液嘴接上。
(2)打開電子天平至天平穩(wěn)定。
(3)將移液器的容量調(diào)至被檢點(diǎn),選擇與吸引桿配套的吸液嘴;在移液器的吸引桿的下端,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)吸液嘴,以保證移液器的密封性;來(lái)回吸放超純水5次使吸液嘴預(yù)濕。
(4)選擇合適的容器作為稱量杯放在電子天平托盤上,復(fù)零。
注:檢測(cè)10μl以上的體積使用10ml塑料瓶,檢測(cè)10μl以下的體積使用1.5ml螺旋管,以減少稱量杯重量造成的誤差。
(5)垂直地握住移液器,將吸液嘴侵入裝有超純水的容器內(nèi),并保持在液面下2mm~3mm處,緩慢放松按鈕,等待1s~2s后離開液面并在容器壁上?恳幌,以去處多余的液體。
(6)從電子天平中取出稱量杯,將吸液嘴流液口靠在稱量杯內(nèi)壁并與其成45度,緩慢地把按鈕撳到地一停點(diǎn),等待1s~2s再將按鈕完全撳下,然后將吸液嘴沿著稱量杯的內(nèi)壁向上移開。
(7)將稱量杯放在電子天平托盤上,記錄此時(shí)天平顯示出的質(zhì)量,同時(shí)測(cè)量并記錄此時(shí)容器內(nèi)蒸餾水的質(zhì)量。
(8)重復(fù)五次執(zhí)行(4)-(7)步驟,但如果發(fā)現(xiàn)測(cè)量值已經(jīng)超出最大允許誤差則無(wú)需重復(fù)直接判為不合格。
4.數(shù)據(jù)處理
移液器在標(biāo)準(zhǔn)溫度20℃時(shí)的實(shí)際容量值。
5.核查結(jié)果的處理
(1)外觀、密合性不合格,移液器禁止使用,標(biāo)定“不合格”,進(jìn)行維修或報(bào)廢。(2)外觀、密合性合格,且所有使用量程的誤差小于最大允許誤差,標(biāo)定“合格”。 表1 移液器最大允許誤差 移液器在標(biāo)準(zhǔn)溫度20℃時(shí),其容量允許誤差和測(cè)量重復(fù)性應(yīng)滿足下表要求:
(3)外觀、密合性合格但部分量程的誤差大于最大允許誤差,標(biāo)定可用的量程。(4)如果移液器讀數(shù)滑位,或按動(dòng)活塞引起數(shù)值改變,因進(jìn)行標(biāo)注。
6.核查周期
每六個(gè)月進(jìn)行一次,時(shí)間在兩次外校之間完成。儀器維修或其他例外情況應(yīng)及時(shí)進(jìn)行。
正確的使用移液器可以促使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更為精確,減少實(shí)驗(yàn)誤差,同時(shí)也能延長(zhǎng)移液器的使用壽命。