熒光定量PCR(Real-time PCR),是指在PCR擴增反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),通過對擴增反應(yīng)中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時檢測,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
對照的目的是對檢測的各個環(huán)節(jié)進(jìn)行監(jiān)控,因此我們按照檢測的流程對對照進(jìn)行梳理。
常規(guī)熒光定量PCR的流程是:
樣品采集-運輸-樣品處理-核酸提取-反轉(zhuǎn)錄(RNA病毒)-擴增-結(jié)果讀取。
1、陽性對照和陰性對照
陽性對照和陰性對照是指在相同的處理條件下,比如一份已知的感染樣品和一份已知的未感染樣品,都進(jìn)行了提取和擴增最終獲得了陽性結(jié)果和陰性結(jié)果。陰陽性對照強調(diào)處理過程與樣品一致,并且有明確的預(yù)期結(jié)果。
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