下列步驟請在無菌環(huán)境下操作：
1、以沾有70%酒精的棉花，擦拭外管，在火焰上加熱外管之尖端。
2、滴數(shù)滴無菌水于加熱處，使外管破裂，再以硬棒敲破尖端。
3、取出隔熱纖維紙和內(nèi)管，以滅菌過的鑷子取出內(nèi)管之棉塞。
4、( a ) 適用于細菌
用無菌吸管，吸取0.3-0.5 ml指定之液體培養(yǎng)基，滴入內(nèi)管內(nèi)，并輕微震蕩（可用該吸管協(xié)助），直到均勻懸浮。
( b ) 適用于霉菌、酵母菌
用無菌吸管，吸取0.3-0.5 ml無菌水，滴入內(nèi)管內(nèi)，待干燥粉末溶解后，以無菌吸管吸取并滴入約含有5ml無菌水之試管內(nèi)，輕微震蕩使其均勻后，靜置30至60分鐘。
5、取0.1-0.2 ml之菌體懸浮液于指定的平板培養(yǎng)基上，做劃線分離培養(yǎng)或做成一系列之稀釋，用無菌L型玻棒均勻涂抹，以檢驗菌種之純度及活化情形，而剩余的菌體則全部移入指定的液體培養(yǎng)基內(nèi)，并依指定的溫度培養(yǎng)之。
6、某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后，遲滯期 ( lag period ) 較長，必須等培養(yǎng)二倍時間后才能長出，且再經(jīng)過一、二次繼代培養(yǎng) (Subculture) 后才能正常生長。經(jīng)過以上的努力后仍培養(yǎng)失敗，才視為不能活化。
7、若菌種未能活化，或活化之菌落有疑問時，請于收到菌種之一個月內(nèi)，以問題菌株反應(yīng)單傳真至本中心，即進行處理。
8．未開封之冷凍干燥管，請冷藏于4℃冰箱，切勿冷凍保存。